BSA-FITC
FITC修飾BSA用于血漿蛋白行為模擬與納米系統(tǒng)評估
一、產品概述
項目 內容
中文名稱 熒光素標記牛血清白蛋白
英文名稱 BSA-FITC(Fluorescein Isothiocyanate-labeled Bovine Serum Albumin)
別名 FITC-BSA、FITC-Albumin
分子量 約66,000 Da(BSA本體)
激發(fā)波長(Ex) 495 nm
發(fā)射波長(Em) 520 nm
熒光基團 FITC(Fluorescein Isothiocyanate)
形態(tài) 凍干粉末或溶液,淡黃色至黃綠色
純度 ≥98%(SDS-PAGE,HPLC)
標記度 3–12 mol FITC/mol BSA(可定制)
儲存條件 -20℃干燥避光
有效期 12個月(未開封)
二、產品背景與合成原理
1. 牛血清白蛋白(BSA)
BSA 是一種穩(wěn)定性高的單體蛋白質,來源于牛血清,廣泛用于生物化學、分子生物學、免疫學實驗中,作為:
標準蛋白(定量);
穩(wěn)定劑、封閉劑;
蛋白遞送載體;
藥物或納米材料負載平臺。
BSA具有多個可標記的氨基(賴氨酸殘基)和疏水結構域,適合修飾與偶聯(lián)。
2. FITC標記機制
FITC(熒光素異硫氰酸酯)分子中的異硫氰酸基團(–N=C=S)可與BSA分子上的伯胺基(主要是賴氨酸側鏈)反應,形成穩(wěn)定的 硫脲鍵,從而實現(xiàn)熒光標記。
通過調節(jié)反應條件(如FITC比例、反應時間、pH值),可控制標記密度,通常維持在 3–8個FITC/BSA 之間,以平衡熒光強度和生物活性。
三、理化性質與質控參數(shù)
項目 指標
外觀 淡黃至黃綠色粉末或液體
溶解性 水、PBS、細胞培養(yǎng)液、Tris緩沖液等
蛋白濃度測定 采用BCA或紫外法(A280)
熒光特性 穩(wěn)定發(fā)綠色熒光,Ex/Em:495/520 nm
標記率檢測 比值A495/A280 或 HPLC色譜圖分析
蛋白完整性 SDS-PAGE顯示單一條帶,無降解
無菌性 可通過0.22 μm過濾使用
內毒素 可提供低內毒素版本(<0.1 EU/mg)
四、應用領域
1. 細胞攝取與吞噬實驗
BSA-FITC 常用于檢測細胞(特別是巨噬細胞、腫瘤細胞、樹突狀細胞)對蛋白質的攝取能力:
內吞機制(胞飲、胞吞)分析;
吞噬功能活性測定;
比較不同處理對吞噬作用的影響;
與LysoTracker等染料共染觀察胞內定位。
2. 血管通透性研究
由于BSA分子大小接近于血漿蛋白,BSA-FITC 常用于:
動物模型中血管滲透性測定;
腫瘤血管外滲研究;
肺水腫、腦血管屏障通透性實驗;
熒光顯微鏡下觀察蛋白滲透行為。
3. 納米粒/藥物載體構建
BSA可作為蛋白載體或模板,用于:
構建BSA納米粒(如BSA-FITC-NPs);
表征納米粒釋放行為與靶向性;
BSA作為功能化殼層驗證其細胞靶向結合能力。
4. 蛋白擴散、組織動力學研究
比較不同組織對蛋白滲透、吸收、殘留的能力;
驗證水凝膠、支架材料的可控釋放能力;
熒光示蹤在活體或離體條件下的蛋白擴散行為。
5. 封閉與染料兼容實驗驗證
在多色免疫熒光實驗中,BSA-FITC可用于測試染料通道干擾或封閉劑質量,作為陽性或背景對照。
五、使用說明
1. 溶解方法
將BSA-FITC凍干粉緩慢溶于無菌PBS或去離子水;
建議濃度:1–10 mg/mL;
配制完成后可分裝避光,4℃保存1周內使用。
2. 實驗推薦濃度(按使用場景)
應用 濃度范圍
細胞內吞 10–100 μg/mL
動物注射 1–10 mg/mL
納米粒制備 0.1–2 mg/mL
熒光成像 10–100 μg/mL
滲透性研究 1–5 mg/mL
六、注意事項
避光操作:FITC易光降解,實驗過程務必避光;
pH敏感性:FITC的熒光在中性偏堿環(huán)境(pH 7.4–8.0)下穩(wěn)定;
反復凍融:避免多次凍融,推薦分裝;
蛋白變性:避免高溫和端pH處理,影響B(tài)SA功能;
染料干擾:FITC信號可能受其他綠色熒光通道干擾,需注意通道選擇。
七、包裝信息與訂購規(guī)格
規(guī)格 貨號(示例) 儲存 推薦用途
1 mg BSA-FITC-1MG -20℃避光 流式、成像
5 mg BSA-FITC-5MG -20℃避光 多次細胞實驗
10 mg BSA-FITC-10MG -20℃避光 動物模型使用
100 mg 定制 -20℃避光 大量載體制備
低內毒素版本 可選 -20℃避光 動物或免疫實驗
八、相關產品推薦
BSA-Texas Red / BSA-Cy5:紅色/遠紅熒光蛋白標記;
FITC-Dextran:用于細胞滲透性與血管通透實驗;
Albumin-Cy7:適用于體內近紅外成像;
FITC-OVA:原加工研究;
未標記BSA:封閉劑/對照組使用。
九、總結
BSA-FITC 是一種經(jīng)典且廣泛應用的蛋白熒光探針,結合了 BSA 的穩(wěn)定性和 FITC 的熒光性能,可在細胞攝取、血管滲透、藥物遞送、組織動力學等多個研究方向中實現(xiàn)蛋白分子的可視化與定量分析。使用時應注意其光敏性與pH依賴性,選用合適的標記度和濃度將有助于獲得高質量實驗數(shù)據(jù)。
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廠家:西安pg電子官方生物科技有限公司
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
產地:西安
溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!
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