FITC-LPS

FITC標記脂多糖用于TLR4受體識別與內(nèi)吞作用研究

一、產(chǎn)品概述

產(chǎn)品名稱：FITC-LPS（熒光素標記脂多糖）

英文名稱：FITC-labeled Lipopolysaccharide

別名：Fluorescein Isothiocyanate-LPS；熒光標記脂多糖

常見來源：大腸桿菌（E. coli O55:B5、O111:B4、O26:B6 等）

分子量：>10,000 Da（天然LPS為高分子雜多糖，分子量不定）

純度：≥95%（脫蛋白）

熒光激發(fā)/發(fā)射波長：Ex 495 nm / Em 520 nm

外觀：淡黃綠色至黃綠色凍干粉末或溶液

溶解性：可溶于PBS、H?O、DMSO、緩沖液等

儲存條件：-20°C避光干燥保存（推薦避光分裝）

保質(zhì)期：12個月（未開封）

二、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)

1. LPS結(jié)構(gòu)簡介

脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性菌外膜的重要組成部分，由三部分構(gòu)成：

脂A（Lipid A）：LPS的疏水部分，負責激活Toll樣受體（TLR4）；

核心多糖（Core oligosaccharide）：連接脂A與O原；

O-特異性原（O-antigen）：重復單位組成的長鏈多糖，決定菌株的特異性。

2. FITC標記原理

FITC（Fluorescein isothiocyanate）通過異硫氰酸基（–N=C=S）與LPS中的伯胺類基團（主要來源于修飾的核心糖或微量蛋白）發(fā)生共價反應，形成穩(wěn)定的硫脲結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)熒光標記。標記后LPS保留免疫活性和細胞識別功能，同時具備強烈綠色熒光。

3. 熒光性能

激發(fā)波長：495 nm

發(fā)射波長：520 nm

適用檢測儀器：熒光顯微鏡、激光共聚焦、流式細胞儀、板式讀數(shù)儀等。

三、合成與質(zhì)量控制

1. 合成步驟簡述

將高純度LPS溶于堿性緩沖液（如碳酸氫鈉緩沖液）；

將FITC溶于DMSO，緩慢加入LPS溶液中；

室溫反應 2~4 小時，避光；

采用透析袋（MWCO ~3.5 kDa）或凝膠層析去除未結(jié)合的FITC；

冷凍干燥，終得粉末狀FITC-LPS。

2. 質(zhì)控指標

FITC結(jié)合度：一般為0.5–2 mol FITC/mol LPS；

熒光強度：確保高信噪比；

LPS活性檢測：保留對TLR4的激活能力（可通過細胞實驗或HEK-Blue? hTLR4系統(tǒng)檢測）；

無蛋白殘留：采用蛋白酶和凝膠色譜去除污染。

四、應用方向

1. 免疫學研究

FITC-LPS常被用于研究LPS介導的免疫應答，如：

TLR4介導的先天免疫激活；

單核細胞、巨噬細胞的識別與激活；

炎癥因子（如IL-6、TNF-α）釋放研究；

細胞因子表達分析；

體內(nèi)外炎癥模型構(gòu)建。

2. 細胞攝取與定位

通過FITC標記，可追蹤LPS的攝取、胞內(nèi)運輸與分布：

巨噬細胞攝取動力學研究；

內(nèi)吞通路與胞內(nèi)運輸分析（如與溶酶體共定位）；

LPS與膜蛋白/受體的結(jié)合行為觀察；

可與DAPI、LysoTracker等染料共染成像。

3. 流式細胞術(shù)分析

FITC-LPS可用于：

分析LPS與細胞表面或胞內(nèi)受體結(jié)合情況；

測定不同細胞類型對LPS的響應程度；

鑒別高攝取亞群；

研究LPS競爭性抑制或中和體活性。

4. 納米遞送系統(tǒng)的模型分子

由于LPS分子大、復雜且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，F(xiàn)ITC-LPS常用于：

熒光示蹤LPS包裹或共價修飾的納米顆粒；

構(gòu)建LPS仿生膜模型；

研究LPS在遞送系統(tǒng)中釋放機制與靶向能力。

五、使用方法與建議

1. 溶解方法

推薦緩慢加入無菌PBS緩沖液（pH 7.4）中，輕微渦旋；

可用37°C水浴短暫加熱以助溶；

避免劇烈震蕩，防止分子解聚。

2. 工作濃度建議

實驗類型 推薦濃度

免疫刺激（細胞） 10–100 ng/mL

成像實驗 1–10 μg/mL

流式細胞術(shù) 0.1–5 μg/mL

3. 保存與分裝

建議溶液分裝儲存在-20°C，避光；

避免反復凍融，使用低吸附EP管；

粉末狀態(tài)可保存12個月，溶液建議1個月內(nèi)用完。

六、注意事項

FITC對光敏感，操作過程中需避免強光照射；

部分細胞系對LPS特別敏感，需預實驗確定濃度；

不同菌株來源的LPS免疫原性不同，選擇應根據(jù)實驗需求；

如用于動物實驗，請注意其致熱性和炎癥反應強度；

FITC可能干擾LPS結(jié)構(gòu)或功能，務必驗證其生物活性是否保留。

七、包裝信息

包裝規(guī)格 貨號示例 儲存溫度 形態(tài)

100 μg FITC-LPS-100 -20°C 凍干粉

500 μg FITC-LPS-500 -20°C 凍干粉

1 mg FITC-LPS-1MG -20°C 凍干粉或水溶液

定制規(guī)格 可定制菌株/濃度 -20°C 客戶指定

可根據(jù)客戶需求提供不同菌株來源（E. coli O55:B5, O111:B4 等）或不同F(xiàn)ITC標記密度的產(chǎn)品。

八、相關(guān)產(chǎn)品推薦

FITC-LTA（脂磷壁酸）：用于革蘭陽性菌成分標記；

Cy5-LPS / TRITC-LPS：用于多通道成像；

FITC-Dextran：用于細胞通透性和內(nèi)吞實驗；

TLR4拮劑（如TAK-242）：配合使用用于信號通路研究。

西安pg電子官方生物專業(yè)提供各類熒光標記產(chǎn)品及定制服務，覆蓋小分子藥物、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料，滿足科研和產(chǎn)業(yè)在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領域的需求。

西安pg電子官方生物確保標記分子高效、穩(wěn)定且保留生物活性。我們支持個性化定制，靈活設計標記方案，快速響應客戶需求。

廠家:西安pg電子官方生物科技有限公司

用途:科研

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)地:西安

溫馨提醒:僅供科研，不能用于人體實驗!

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