文獻：甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁酸酯 (mPEG-SBA) 合成及與 EPO β 結(jié)合過程中的分析色譜方法

鏈接：https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1570023223000892

作者：塞米拉 ·凱里，瑪麗亞姆 ·基亞尼，侯賽因 扎西 ，馬吉德 ·沙巴齊，侯賽因 ·阿米尼 · b

節(jié)選：

研究了β-依泊汀(EPO) 與甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁酸酯 (mPEG-SBA)的偶聯(lián)反應。以 mPEG 為原料合成 mPEG-SBA 化合物，并用配備蒸發(fā)光散射檢測器的反相色譜系統(tǒng)對所得中間體和*終產(chǎn)物進行分析。采用苯甲酰氯標記PEG中的羥基、芐胺標記琥珀酰亞胺的方法對不同的 PEG 進行分離和表征。將合成的 mPEG-SBA 用于 EPO 的 PEG 化。采用尺寸排阻色譜法監(jiān)測反應，同時測定 PEG 化、未反應的 EPO 和蛋白質(zhì)聚集體。在硼酸鹽緩沖液（0.1 M，pH 7.8）和 PEG/蛋白質(zhì)摩爾比為 3:1 的條件下，單 PEG 化 EPO 的產(chǎn)量*高，而多 PEG 化 EPO 變體的產(chǎn)量*低。盡管EPO被認為是一種穩(wěn)定的糖蛋白激素，在冷藏條件下仍保持單體狀態(tài)，但用mPEG-SBA對EPO進行PEG化會導致大量EPO二聚體的形成。EPO二聚體和聚PEG化EPO的形成具有pH依賴性，在較低的pH值下，聚集體的數(shù)量較高，而聚PEG化形式的數(shù)量較低。因此，聚集的EPO應被視為主要的PEG化相關雜質(zhì)�？傊�，本研究強調(diào)了采用合適的分析方法控制mPEG-SBA的合成及其與EPO的結(jié)合的重要性。

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