結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
AFDye 488是一種結(jié)構(gòu)類似于Alexa Fluor 488的綠色熒光染料,具有高亮度和優(yōu)異的光穩(wěn)定性。
其琥珀酰亞胺酯(NHS酯)基團(tuán)可特異性與蛋白質(zhì)或多肽中的初級氨基(主要是賴氨酸殘基)反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵,實(shí)現(xiàn)共價(jià)標(biāo)記。
NHS酯活性基團(tuán)對水敏感,反應(yīng)條件需控制水含量,通常在pH 7.4-8.5的緩沖液中進(jìn)行。
主要應(yīng)用
蛋白質(zhì)和多肽標(biāo)記
用于標(biāo)記抗體、酶、受體等蛋白質(zhì),實(shí)現(xiàn)熒光追蹤和定量檢測。
免疫熒光染色
應(yīng)用于免疫組化和免疫熒光實(shí)驗(yàn),提供明亮、穩(wěn)定的信號。
細(xì)胞成像
用于細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記及活細(xì)胞追蹤,適合共聚焦和熒光顯微鏡觀察。
熒光探針制備
與寡核苷酸、脂質(zhì)等含氨基的分子偶聯(lián),制作功能性熒光探針。
性能優(yōu)勢
高量子產(chǎn)率和亮度,信號清晰,適合低豐度靶標(biāo)檢測。
良好的光穩(wěn)定性,支持長時(shí)間成像和多次激發(fā)。
快速、特異的共價(jià)結(jié)合,提高標(biāo)記效率和穩(wěn)定性。
綠色熒光光譜,兼容多重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中的其他熒光染料。
使用注意事項(xiàng)
反應(yīng)時(shí)避免長時(shí)間暴露于水環(huán)境,防止NHS酯水解失活。
反應(yīng)后需及時(shí)去除未反應(yīng)的游離染料,減少背景干擾。
儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)密封避光,置于-20℃冷藏保存。
操作過程中應(yīng)佩戴適當(dāng)?shù)膫(gè)人防護(hù)設(shè)備,避免吸入或皮膚接觸。
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