產(chǎn)品名稱：Tetranzine-PEG-COOH，四嗪-聚乙二醇-羧酸的反應(yīng)條件優(yōu)化

操作注意事項(xiàng)

反應(yīng)條件優(yōu)化：

pH控制：NHS酯反應(yīng)需在pH 7-9進(jìn)行，避免氨基質(zhì)子化導(dǎo)致反應(yīng)效率降低。

溫度與時(shí)間：室溫反應(yīng)4-6小時(shí)（Tetrazine偶聯(lián)）和2-4小時(shí)（COOH活化）通常足夠，延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間可能增加副產(chǎn)物（如Tetrazine分解）生成。

避光操作：Tetrazine對(duì)光敏感，需在暗處進(jìn)行反應(yīng)和純化。

純化策略選擇：

透析法：簡(jiǎn)單易行，但耗時(shí)較長(zhǎng)，適合初步純化。

凝膠過(guò)濾色譜法：分離效率高，可同時(shí)去除鹽和小分子雜質(zhì)，但需要專業(yè)設(shè)備。

生物活性驗(yàn)證：

點(diǎn)擊化學(xué)效率：用Tetrazine-PEG-COOH與TCO-熒光探針?lè)磻?yīng)，通過(guò)熒光強(qiáng)度確認(rèn)標(biāo)記效率（≥80%）。

穩(wěn)定性測(cè)試：在PBS中孵育24小時(shí)后，檢測(cè)Tetrazine-PEG-COOH的降解率（應(yīng)＜10%），確認(rèn)其穩(wěn)定性。

儲(chǔ)存條件：

短期：4℃避光保存（數(shù)周），需充氮?dú)夥乐寡趸��?/p>

長(zhǎng)期：-20℃凍干保存（數(shù)月），使用前用PBS或生理鹽水復(fù)溶。

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