產(chǎn)品名稱(chēng):TCO-PEG5-GGG-NH2的操作注意事項(xiàng)
操作注意事項(xiàng)
反應(yīng)條件優(yōu)化:
pH控制:NHS酯反應(yīng)需在pH 7-9進(jìn)行,避免氨基質(zhì)子化導(dǎo)致反應(yīng)效率降低。
溫度與時(shí)間:室溫反應(yīng)4-6小時(shí)(TCO偶聯(lián))和2-4小時(shí)(GGG偶聯(lián))通常足夠,延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間可能增加副產(chǎn)物(如TCO異構(gòu)化)生成。
避光操作:TCO對(duì)光敏感,需在暗處進(jìn)行反應(yīng)和純化。
純化策略選擇:
透析法:簡(jiǎn)單易行,但耗時(shí)較長(zhǎng),適合初步純化。
凝膠過(guò)濾色譜法:分離效率高,可同時(shí)去除鹽和小分子雜質(zhì),但需要專(zhuān)業(yè)設(shè)備。
生物活性驗(yàn)證:
點(diǎn)擊化學(xué)效率:用TCO-PEG5-GGG-NH?與四嗪-熒光探針?lè)磻?yīng),通過(guò)熒光強(qiáng)度確認(rèn)標(biāo)記效率(≥80%)。
穩(wěn)定性測(cè)試:在PBS中孵育24小時(shí)后,檢測(cè)TCO-PEG5-GGG-NH?的降解率(應(yīng)<10%),確認(rèn)其穩(wěn)定性。
儲(chǔ)存條件:
短期:4℃避光保存(數(shù)周),需充氮?dú)夥乐寡趸?/p>
長(zhǎng)期:-20℃凍干保存(數(shù)月),使用前用PBS或生理鹽水復(fù)溶。
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