產(chǎn)品名稱：DBCO-PEG-TCO的反應(yīng)條件優(yōu)化

操作注意事項

反應(yīng)條件優(yōu)化：

pH控制：NHS酯反應(yīng)需在pH 7-9進行，避免氨基質(zhì)子化導(dǎo)致反應(yīng)效率降低。

溫度與時間：室溫反應(yīng)4-6小時（DBCO偶聯(lián)）和2-4小時（TCO偶聯(lián)）通常足夠，延長反應(yīng)時間可能增加副產(chǎn)物（如DBCO二聚體或TCO異構(gòu)化）生成。

避光操作：DBCO和TCO均對光敏感，需在暗處進行反應(yīng)和純化。

純化策略選擇：

透析法：簡單易行，但耗時較長，適合初步純化。

凝膠過濾色譜法：分離效率高，可同時去除鹽和小分子雜質(zhì)，但需要專業(yè)設(shè)備。

生物活性驗證：

點擊化學(xué)效率：用DBCO-PEG-TCO與疊氮化物-熒光探針和四嗪-藥物分別反應(yīng)，通過熒光強度或藥物活性確認雙重標記效率（均應(yīng)≥80%）。

穩(wěn)定性測試：在PBS中孵育24小時后，檢測DBCO-PEG-TCO的降解率（應(yīng)＜10%），確認其穩(wěn)定性。

儲存條件：

短期：4℃避光保存（數(shù)周），需充氮氣防止氧化。

長期：-20℃凍干保存（數(shù)月），使用前用PBS或生理鹽水復(fù)溶。

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