sulfo-Cyanine3 dimethyl 是一種水溶性的熒光染料,屬于 Cyanine 染料家族中的 Cyanine3(Cy3)系列,經(jīng)過磺酸鹽(sulfo)基團修飾以增強其水溶性,同時通過雙甲基(dimethyl)修飾提高其光學性能和化學穩(wěn)定性。該染料因其優(yōu)異的光譜特性、良好的水溶性和生物相容性,在分子標記、生物成像、熒光檢測和多色熒光實驗中被廣泛使用。
一、分子結(jié)構(gòu)與光學性能
Cyanine3 是一類經(jīng)典的共軛鏈染料,結(jié)構(gòu)由兩個吲哚(indole)或苯并吲哚環(huán)通過含有三個碳原子的共軛鏈連接組成。其激發(fā)和發(fā)射波長分別位于綠色至橙色區(qū)域,具體約為激發(fā)波長550 nm,發(fā)射波長570 nm,發(fā)射顏色明亮的橙紅色。
sulfo-Cyanine3 dimethyl 通過引入磺酸鹽基團,提升了染料的水溶性,避免了染料在水相中因疏水作用聚集而導致的熒光淬滅;雙甲基修飾則增強了其分子結(jié)構(gòu)的剛性,提高了量子產(chǎn)率和光穩(wěn)定性,使染料更適合長時間成像和檢測。
主要光學特性包括:
激發(fā)波長:約550 nm
發(fā)射波長:約570 nm
高量子產(chǎn)率:使其發(fā)射信號強烈明亮
良好光穩(wěn)定性:適合長時間光照下使用
優(yōu)良的水溶性:減少非特異性吸附和背景信號
二、水溶性和生物相容性
傳統(tǒng)的Cyanine3染料具有一定的疏水性,易在水中聚集,導致熒光淬滅和成像質(zhì)量下降。sulfo-Cyanine3 dimethyl 通過在分子中引入多個帶負電荷的磺酸鹽基團,顯著增強了染料的水溶性和分散性,避免了聚集效應(yīng)。
此外,負電荷帶來的親水性降低了染料與細胞膜或蛋白的非特異結(jié)合,提高了實驗的特異性和信噪比。這使得該染料在細胞標記、免疫染色及體外分子檢測中表現(xiàn)出好的生物兼容性,減少細胞毒性。
三、化學修飾與偶聯(lián)功能
為了適應(yīng)不同的生物標記需求,sulfo-Cyanine3 dimethyl 通常設(shè)計為含有多種活性官能團的衍生物,方便與生物大分子進行共價結(jié)合:
NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester):與蛋白質(zhì)或多肽中的氨基反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵,廣泛用于抗體、酶和受體標記。
Maleimide:特異性與含硫氫基的半胱氨酸殘基反應(yīng),適合蛋白質(zhì)定點標記。
疊氮基和炔基:用于“點擊化學”反應(yīng),實現(xiàn)高效且選擇性的偶聯(lián)。
羧基:可通過活化后與胺基偶聯(lián),擴展應(yīng)用范圍。
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