sulfo-Cyanine5 dimethyl 是一種水溶性的近紅外熒光染料,屬于 Cyanine 染料家族,特別是 Cyanine5(Cy5)系列的衍生物。該染料通過引入磺酸鹽(sulfo)基團增強其水溶性,并通過雙甲基(dimethyl)修飾提高其光學性能和穩(wěn)定性。它以激發(fā)波長約為 649 nm、發(fā)射波長約為 670 nm 的特性,在分子生物學、生物成像和免疫熒光分析等領域得到廣泛應用。
一、分子結構與光學性能
Cyanine5 是一種經(jīng)典的共軛鏈染料,由兩個吲哚(indole)環(huán)通過含有五個碳原子的共軛鏈連接而成。它屬于中波長近紅外熒光染料,因其優(yōu)異的光譜性質和生物相容性被廣泛用于熒光標記。
sulfo-Cyanine5 dimethyl 在此基礎上,引入多個磺酸基團,賦予染料良好的水溶性和負電荷,有效防止染料分子在水溶液中聚集和淬滅。同時,雙甲基取代通常發(fā)生在吲哚環(huán)的特定位點,增強染料的光學穩(wěn)定性和量子產(chǎn)率。
激發(fā)波長:約 649 nm
發(fā)射波長:約 670 nm
高量子產(chǎn)率:確保高亮度熒光信號
優(yōu)異光穩(wěn)定性:適合長時間激發(fā)和成像
良好水溶性:減少非特異結合,提升實驗信噪比
二、水溶性及生物相容性
水溶性是生物熒光染料設計的關鍵指標之一。傳統(tǒng)的 Cyanine5 染料由于疏水性較強,容易在水溶液中形成聚集體,導致熒光淬滅和信號不穩(wěn)定。sulfo-Cyanine5 dimethyl 通過磺酸鹽修飾,顯著提升了其:
水溶性:在水及緩沖液中高度溶解,避免了染料的自我淬滅。
電荷性質:帶有負電荷,減少了染料與細胞或蛋白質的非特異性吸附。
生物相容性:低細胞毒性,適合細胞及活體實驗。
這種修飾使其成為熒光標記蛋白質、抗體、核酸等生物大分子的理想選擇。
三、化學修飾與偶聯(lián)功能
sulfo-Cyanine5 dimethyl 通常設計為含有活性官能團的衍生物,使其能方便地與目標分子共價偶聯(lián)。常見的活性基團包括:
NHS 酯(N-hydroxysuccinimide ester):可與蛋白質、肽或其他含胺基的分子反應,形成穩(wěn)定的酰胺鍵。
Maleimide:與半胱氨酸的硫醇基反應,進行選擇性標記。
炔基和疊氮基:可通過點擊化學(Click Chemistry)實現(xiàn)特異性連接。
羧基:通過活化后可與多種胺類分子偶聯(lián)。
這些修飾賦予 sulfo-Cyanine5 dimethyl 靈活的偶聯(lián)能力,廣泛用于生物標記、分子探針構建和生物傳感器設計。
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