產(chǎn)品名稱：ICG-NHS(mono-sulfo-cy7.5 NHS)，吲哚菁綠活性酯的合成方法

合成方法

ICG-NHS（Mono-Sulfo-Cy7.5 NHS）的合成通常涉及以下步驟：

（1）Cy7.5與磺酸基團(tuán)的引入

方法：

通過化學(xué)合成將Cy7.5染料與單磺酸基團(tuán)連接，形成Mono-Sulfo-Cy7.5。

磺化反應(yīng)：

在Cy7.5的芳香環(huán)或側(cè)鏈上引入磺酸基團(tuán)，通常使用濃硫酸或發(fā)煙硫酸作為磺化試劑，控制反應(yīng)條件以避免過度磺化。

純化：

通過柱色譜或HPLC分離單磺化產(chǎn)物，去除未反應(yīng)的原料和副產(chǎn)物。

（2）ICG與Mono-Sulfo-Cy7.5的偶聯(lián)

方法：

將ICG與Mono-Sulfo-Cy7.5通過共價鍵連接，形成ICG-Mono-Sulfo-Cy7.5。

反應(yīng)類型：

酰胺鍵形成：若ICG或Mono-Sulfo-Cy7.5含有羧基（-COOH），可通過活化酯（如NHS酯）與氨基反應(yīng)形成酰胺鍵。

點(diǎn)擊化學(xué)：利用疊氮化物（-N?）與炔烴（-C≡CH）的環(huán)加成反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)高效偶聯(lián)。

反應(yīng)條件：

溶劑：無水DMF或DMSO（對于疏水反應(yīng)），或PBS緩沖液（對于親水反應(yīng)）。

溫度：室溫至40℃，具體取決于反應(yīng)類型和底物穩(wěn)定性。

時間：數(shù)小時至過夜，需通過TLC或HPLC監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)度。

純化：

通過透析（截留分子量根據(jù)產(chǎn)物大小選擇）或HPLC去除未反應(yīng)的小分子和副產(chǎn)物。

（3）NHS活性酯的引入

方法：

將ICG-Mono-Sulfo-Cy7.5的羧基通過NHS/DCC活化，生成NHS酯。

反應(yīng)步驟：

將ICG-Mono-Sulfo-Cy7.5溶解在無水DMF中，加入NHS和DCC（二環(huán)己基碳二亞胺）。

室溫攪拌數(shù)小時，使羧基與NHS形成活化酯。

過濾去除生成的DCU（二環(huán)己基脲）沉淀，收集濾液。

通過柱色譜或HPLC純化NHS酯產(chǎn)物。

注意事項(xiàng)：

反應(yīng)需在無水條件下進(jìn)行，避免NHS酯水解。

DCC可能引起過敏反應(yīng)，操作時需佩戴手套和護(hù)目鏡。

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