FITC標(biāo)記血紅蛋白
FITC(熒光異硫氰酸熒光素)標(biāo)記的血紅蛋白(FITC-Hb)是一種用于生物成像和免疫檢測(cè)的熒光標(biāo)記蛋白。血紅蛋白是一種鐵卟啉蛋白,廣泛存在于紅細(xì)胞中,主要負(fù)責(zé)氧氣的運(yùn)輸。通過與FITC偶聯(lián),可賦予其熒光特性,便于追蹤、檢測(cè)和定量分析。
制備方法:
FITC標(biāo)記反應(yīng)通常在弱堿性環(huán)境中(pH 8.0–9.0)進(jìn)行。FITC與血紅蛋白中的游離氨基(如賴氨酸殘基)發(fā)生異硫氰酸酯-胺反應(yīng),形成穩(wěn)定的硫脲鍵。反應(yīng)后需通過透析或?qū)游鋈コ坞xFITC。
物理特性與檢測(cè):
FITC標(biāo)記后的血紅蛋白在488 nm波長(zhǎng)下激發(fā),在約520 nm波長(zhǎng)下發(fā)射綠色熒光。熒光強(qiáng)度受pH、環(huán)境極性等影響,需在PBS等緩沖體系中保持穩(wěn)定。
應(yīng)用:
細(xì)胞攝取與定位實(shí)驗(yàn):通過FITC信號(hào)觀察血紅蛋白在細(xì)胞中的分布及代謝;
紅細(xì)胞膜融合或輸氧機(jī)制研究;
納米載體表面功能化,用于靶向修飾與免疫識(shí)別;
生物兼容性標(biāo)記物:與多肽、藥物偶聯(lián)實(shí)現(xiàn)診療一體化。
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