FITC-Protein G,即熒光素標(biāo)記的蛋白G,是通過(guò)將熒光素異硫氰酸酯(FITC)與蛋白G偶聯(lián)而成的熒光探針。蛋白G源自溶血性鏈球菌(Streptococcus species),與蛋白A類似,能與哺乳動(dòng)物IgG的Fc段高親和結(jié)合,但其與不同IgG亞類及物種的結(jié)合譜更廣泛,特別是對(duì)人IgG3具有較高親和性,而蛋白A則對(duì)該亞類親和力較低。
FITC-Protein G具備綠色熒光發(fā)射(約520 nm),廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、免疫學(xué)及分子診斷領(lǐng)域。在流式細(xì)胞術(shù)中,F(xiàn)ITC-Protein G常被用于檢測(cè)細(xì)胞表面結(jié)合的IgG抗體,實(shí)現(xiàn)對(duì)抗原表達(dá)的間接定量分析;在熒光顯微鏡實(shí)驗(yàn)中,它用于觀察組織切片或細(xì)胞樣品中的IgG分布。
由于蛋白G與不同物種IgG亞類具有更優(yōu)的結(jié)合性能,相較FITC-Protein A,F(xiàn)ITC-Protein G在檢測(cè)某些物種或亞類時(shí)提供更靈敏、更均衡的檢測(cè)結(jié)果。此外,F(xiàn)ITC-Protein G在免疫沉淀、免疫印跡(Western blot)及ELISA等實(shí)驗(yàn)中,也用于檢測(cè)或捕獲抗體復(fù)合物,提高實(shí)驗(yàn)的特異性和靈敏度。值得注意的是,蛋白G也能與某些IgM、IgA輕微結(jié)合,因此實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)需考慮潛在的非特異性結(jié)合。
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