文獻：

Targeting Fluorescence Imaging of RGD-Modified Indocyanine Green Micelles on Gastric Cancer

文獻鏈接：

https://www.frontiersin.org/journals/bioengineering-and-biotechnology/articles/10.3389/fbioe.2020.575365/full

作者：

Jun Shao&#x;Jun Shao1?Xiaoming Zheng&#x;Xiaoming Zheng1?Longbao FengLongbao Feng2Tianyun LanTianyun Lan3Dongbing DingDongbing Ding1Zikai CaiZikai Cai1Xudong ZhuXudong Zhu1Rongpu LiangRongpu Liang1Bo Wei*Bo Wei1*

細胞系和小鼠

本文使用SGC7901細胞、小鼠成纖維細胞L929。SGC7901細胞在RPMI 1640中培養(yǎng)，而L929細胞在37°C、含5%CO2的加濕氣氛中在DMEM中培養(yǎng)。所有培養(yǎng)基均補充了10%FBS、1%青霉素和1%鏈霉素。

細胞攝取

通過激光共聚焦熒光顯微鏡觀察細胞的內(nèi)化和分布。簡而言之，將SGC7901細胞接種在35 mm細胞培養(yǎng)皿（Nest，801002）中，培養(yǎng)24小時以進行細胞附著。每皿細胞密度為5×104。

接下來，用含有以下成分的新無血清培養(yǎng)基替換培養(yǎng)基DSPE-PEG@ICG和DSPE-PEG-RGD@ICG（等效ICG濃度：1mg/ml）。孵育4和12小時后，用PBS洗滌細胞，并用4%多聚甲醛固定。

隨后，細胞用10μg/ml DAPI染色10分鐘，并用PBS洗滌。最后，使用激光共聚焦熒光顯微鏡（Zeiss LSM 710，德國）觀察膠束的結(jié)合和內(nèi)化。核的參數(shù)設置為λex 405 nm，ICG的參數(shù)設置在λex 633 nm。

為了進一步定量分析，將1×105個SGC7901細胞接種在每孔12孔板中，并用含有以下成分的無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)DSPE-PEG@ICG和DSPE-PEG-RGD@ICG（等效ICG濃度：1mg/ml）處理12小時。在預定時間，收獲細胞并用PBS洗滌。然后，將細胞重新懸浮在PBS中，并立即通過Accuri流式細胞術進行定量分析。

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