文獻(xiàn)：阿昔替尼與PD-L1 siRNA聯(lián)合給藥，協(xié)同血管正常化和免疫檢查點(diǎn)抑制，增強(qiáng)*癌免疫力

鏈接：https://link.springer.com/article/10.1186/s12951-025-03170-y

作者： 劉艷紅，龔黎明景峰，肖聰聰，劉晨飛，陳博涵，陳麗清，金明吉，關(guān)友彥，高忠高&黃偉 

節(jié)選：

DSPE-PEG2000-NGR的合成

DSPE-PEG2000-NGR 的合成依據(jù)先前的研究進(jìn)行，并略作修改 [ 41 ]。簡(jiǎn)而言之，將 50 mg NGR 肽和 154 mg DSPE-PEG2000-MAL 充分溶解于 10 mL HEPEs 溶液（pH 8.0）中，并在 N2 保護(hù)下于室溫?cái)嚢?24 h 。反應(yīng)結(jié)束后，使用透析袋（MWCO 2500）去除游離肽，并通過(guò)凍干獲得最終產(chǎn)品。DSPE-PEG2000-NGR 的結(jié)構(gòu)和分子量分別通過(guò)1 H NMR 光譜和 MALDI-TOF MS 證實(shí)。

Axi/siRNA PD?L1 @NGR-Lipo的制備及表征

首先利用魚精蛋白與siRNA PD ? L1的電荷相互作用制備Pro-siRNA PD?L1。將魚精蛋白和siRNA PD?L1以不同質(zhì)量比（5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1）等體積混合，渦旋5 min，孵育后即得Pro-siRNA PD?L1 。隨后采用薄膜分散法制備Axi/siRNA PD?L1 @NGR-Lipo。具體而言，將1 mg阿昔替尼充分溶解于甲醇中，然后加入到含有4 mg膽固醇、20 mg DOPC和4 mg DSPE-PEG2000-NGR的二氯甲烷溶液中。將混合物在40 ℃減壓下通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀形成磷脂薄膜，并除去殘留的有機(jī)溶劑。隨后，將磷脂膜在40°C下用水水化30分鐘。在探針超聲條件下，在冰水中以60 W超聲20分鐘后獲得Axi@NGR-Lipo。之后，將Pro-siRNA PD -L1與Axi@NGR-Lipo充分混合。使用脂質(zhì)擠出機(jī)（Avanti Polar Lipids）通過(guò)0.22μm聚碳酸酯膜過(guò)濾器擠出20次，獲得Axi/siRNA PD-L1 @NGR-Lipo。Axi/siRNA PD-L1 @Lipo的制備步驟與上述類似，只是將DSPE-PEG2000-NGR替換為DSPE-PEG2000。

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DSPE-PEG-Galactose

DSPE-PEG-Dextran

DSPE-PEG-Chitosan

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DSPE-PEG-Ficoll

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