熒光標(biāo)記多糖的技術(shù)與產(chǎn)品推薦
一、熒光標(biāo)記多糖技術(shù)簡介
熒光標(biāo)記多糖是指將天然或改性多糖(如殼聚糖、葡聚糖、葡聚醛、透明質(zhì)酸、阿拉伯膠、羧甲基纖維素等)與熒光基團(tuán)(如 FITC、Cy3、Cy5、Rhodamine、AF488 等)進(jìn)行共價結(jié)合,使其在具備原有生物活性的基礎(chǔ)上,具備 可視化跟蹤、細(xì)胞成像、生物分布研究、藥物遞送分析 等功能。
該技術(shù)廣泛應(yīng)用于:
生物醫(yī)學(xué)研究(如藥物遞送系統(tǒng)體內(nèi)追蹤)
細(xì)胞攝取機(jī)制研究
靶向性研究
生物材料標(biāo)記
二、標(biāo)記方法與常用化學(xué)策略
熒光標(biāo)記多糖通常通過以下幾種方法實(shí)現(xiàn)共價結(jié)合:
1. 異硫氰酸酯類(如 FITC)
目標(biāo)基團(tuán):多糖上存在的氨基(如殼聚糖的自由氨基)
反應(yīng)機(jī)理:異硫氰酸酯(–N=C=S)與胺基形成穩(wěn)定的硫脲鍵
適用多糖:殼聚糖、氨基化透明質(zhì)酸、氨基化葡聚糖等
代表標(biāo)記物:FITC(Fluorescein isothiocyanate)、TRITC、Rhodamine B isothiocyanate
2. 活性酯類(如 NHS 酯)
目標(biāo)基團(tuán):氨基多糖(或羧基多糖經(jīng)EDC/NHS活化)
反應(yīng)機(jī)理:NHS 酯與胺基反應(yīng)生成酰胺鍵
常用熒光探針:Cy3-NHS、Cy5-NHS、AF488-NHS、NHS-FITC
3. 還原端標(biāo)記(Schiff堿反應(yīng))
目標(biāo)基團(tuán):還原性糖端的醛基(如葡聚糖、右旋糖酐等)
反應(yīng)機(jī)制:醛基與熒光胺(如 FITC-ethylenediamine)形成席夫堿,再還原穩(wěn)定化
4. 點(diǎn)擊化學(xué)(Click Chemistry)
目標(biāo)基團(tuán):多糖預(yù)修飾有疊氮(-N?)或炔基(-C≡C)
反應(yīng)方式:疊氮-炔點(diǎn)擊反應(yīng)(CuAAC)或 SPAAC 無銅點(diǎn)擊
優(yōu)勢:標(biāo)記位點(diǎn)特異、產(chǎn)物穩(wěn)定,適用于復(fù)雜體系
5. 親水性熒光探針修飾
使用水溶性熒光探針可避免標(biāo)記過程中對多糖結(jié)構(gòu)的破壞,常選用如 CF488A、AF647、Sulfo-Cy5 等親水性探針。
三、常見熒光標(biāo)記多糖產(chǎn)品推薦
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 熒光基團(tuán) | 適用研究 |
FITC-Chitosan | FITC-殼聚糖 | FITC(綠色) | 細(xì)胞攝取、黏附、納米載體標(biāo)記 |
Cy5-Dextran 10kDa/70kDa | Cy5-葡聚糖 | Cy5(遠(yuǎn)紅) | 內(nèi)吞/滲透研究、血管通透性檢測 |
TRITC-Dextran | 四甲基羅丹明標(biāo)記葡聚糖 | TRITC(橙紅) | 動物血管成像、淋巴系統(tǒng)成像 |
FITC-Hyaluronic Acid | FITC-透明質(zhì)酸 | FITC | HA受體(CD44)靶向分析 |
Rhodamine B-Dextran | 羅丹明B-葡聚糖 | Rhodamine B | 粘膜通透性、細(xì)胞識別 |
AF488-ConA | Alexa Fluor 488 標(biāo)記的康那白克凝集素 | AF488(綠色) | 糖識別/糖結(jié)合蛋白研究 |
Cy5-Chitosan Nanoparticles | Cy5殼聚糖納米粒 | Cy5 | siRNA遞送跟蹤、成像 |
FITC-Alginate | FITC-海藻酸鈉 | FITC | 水凝膠標(biāo)記、細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)追蹤 |
Cy7-HA Nanoparticles | Cy7-透明質(zhì)酸納米粒 | Cy7(近紅外) | 活體成像、生物分布研究 |
四、熒光標(biāo)記多糖應(yīng)用實(shí)例
1. 細(xì)胞攝取與成像
熒光殼聚糖納米粒(如 FITC-CS NPs)可用于觀察其在不同細(xì)胞系中的攝取途徑(胞飲/胞吞/融合)
2. 藥物遞送路徑示蹤
Cy5-HA納米粒注射后,在動物模型中通過近紅外成像系統(tǒng)實(shí)時追蹤其在體內(nèi)的分布,評估腫瘤靶向效果
3. 粘附/滲透研究
FITC-葡聚糖(Dextran-FITC)在腸道組織中的通透性試驗(yàn)中,能快速評估腸道屏障完整性
4. 水凝膠系統(tǒng)標(biāo)記
FITC-Alginate 可用于構(gòu)建帶熒光可視化的三維水凝膠支架,便于組織工程中跟蹤其降解與細(xì)胞黏附
五、定制服務(wù)推薦(適用于科研或藥物開發(fā))
可根據(jù)項目需求提供以下定制服務(wù):
定制類型 | 內(nèi)容描述 |
多糖種類選擇 | 殼聚糖、右旋糖酐、葡聚糖、海藻酸鈉、透明質(zhì)酸等 |
熒光種類 | FITC、TRITC、Cy3、Cy5、AF488、AF647、Cy7 等 |
標(biāo)記位點(diǎn)控制 | 氨基位點(diǎn)/醛基位點(diǎn)/末端位點(diǎn)選擇性標(biāo)記 |
標(biāo)記度調(diào)控 | 可控制標(biāo)記密度(MFI),防止熒光猝滅 |
純化與鑒定 | 提供HPLC/LC-MS/UV/熒光光譜圖譜和COA報告 |
應(yīng)用形式 | 多糖溶液、凍干粉、納米粒、水凝膠、微球等載體 |
六、總結(jié)
熒光標(biāo)記多糖技術(shù)為多糖材料賦予了“可視化”能力,擴(kuò)展了其在生命科學(xué)與藥物遞送研究中的功能應(yīng)用。通過選擇適合的多糖基礎(chǔ)、熒光基團(tuán)及標(biāo)記策略,可實(shí)現(xiàn)高靈敏、低干擾、可追蹤的研究平臺。無論是用于細(xì)胞攝取觀察、活體分布成像還是靶向識別研究,熒光多糖都是不可或缺的功能性工具。
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