尼羅藍(lán)熒光染料是什么？Nile Blue尼羅藍(lán)熒光激發(fā)波長是多少？

尼羅藍(lán)（Nile Blue）是一種傳統(tǒng)的有機(jī)熒光染料，具有良好的熒光特性和親脂性，常用于細(xì)胞成像、生物膜染色、線粒體標(biāo)記以及熒光探針的開發(fā)。它與結(jié)構(gòu)類似的染料“尼羅紅（Nile Red）”有相似用途，但在某些應(yīng)用中顯示出更強(qiáng)的熒光或更穩(wěn)定的性能。

基本信息

中文名稱：尼羅藍(lán)

英文名稱：Nile Blue A、Nile Blue sulfate

分子式：C??H??ClN?O

分子量：349.85 g/mol

CAS號：3625-57-8

激發(fā)波長（Ex）：約 635–640 nm

發(fā)射波長（Em）：約 660–680 nm

熒光顏色：紅色或近紅外

溶解性：可溶于水、乙醇、DMSO等*性溶劑

應(yīng)用領(lǐng)域

1.細(xì)胞成像

尼羅藍(lán)可用于染色細(xì)胞質(zhì)、線粒體或脂質(zhì)結(jié)構(gòu)，適用于熒光顯微鏡。

具有較高的熒光穿透能力，適合厚組織成像或共聚焦掃描。

2.膜染色

親脂性使其能插入磷脂雙層，用于脂質(zhì)膜染色和細(xì)胞膜示蹤。

在*性環(huán)境中熒光較弱，在疏水環(huán)境中增強(qiáng)，適合作為膜*性探針。

3.線粒體染色

可被線粒體攝取并積聚，部分實(shí)驗(yàn)中作為線粒體選擇性熒光染料使用。

4.DNA染色（較少用）

與DNA結(jié)合后可顯示一定熒光增強(qiáng)，但不如Hoechst或PI敏感。

5.生物傳感

用于開發(fā)熒光探針，如檢測pH、*性、脂質(zhì)含量等的智能染料。

優(yōu)點(diǎn)

激發(fā)/發(fā)射波長遠(yuǎn)離綠色光區(qū)，適用于多重染色實(shí)驗(yàn)

良好的親脂性，可標(biāo)記細(xì)胞膜或疏水結(jié)構(gòu)

熒光較穩(wěn)定，適用于共聚焦成像和較長時間觀察

缺點(diǎn)與注意事項(xiàng)

與尼羅紅對比

常規(guī)染色方法（簡略版）

配制染色液（如：1–10 μM 尼羅藍(lán)溶液于PBS或DMSO稀釋液中）

細(xì)胞用PBS清洗兩遍，去除培養(yǎng)基

加入染色液，37°C孵育15–30分鐘（避光）

用PBS沖洗2–3次，移入成像緩沖液

使用熒光顯微鏡（Cy5或近紅外通道）觀察

總結(jié)

尼羅藍(lán)是一種實(shí)用的紅色熒光染料，適用于多種生物成像用途，特別是在脂質(zhì)膜、線粒體和組織成像中表現(xiàn)良好。其遠(yuǎn)紅區(qū)熒光特性也適用于多染色實(shí)驗(yàn)及組織穿透成像。