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          FITC-Biotin，F(xiàn)luorescein-Biotin，熒光素標記生物素的優(yōu)勢與特征
          
						
          
							發(fā)布時間：2025-05-22     作者：zhn   分享到：
							
          
								
          
								
							
          
						
          
						
          
						
          FITC-Biotin 熒光素標記生物素
          FITC-BIOTIN（熒光素標記生物素）
          FITC-BIOTIN 是由異硫氰酸熒光素（FITC）和生物素通過共價鍵連接而成的熒光探針。該分子保留了生物素對親和素/鏈霉親和素的高親和力，同時具有 FITC 的典型熒光特性（激發(fā)波長約495 nm，發(fā)射約519 nm）。FITC-BIOTIN 常用于免疫熒光、細胞成像、親和標記、ELISA 檢測及微陣列技術(shù)中。其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，水溶性良好，既具靶向識別能力又具熒光示蹤功能，是分子探針和納米載體修飾的優(yōu)選標記分子。
          一、簡介
          名稱：FITC-Biotin
          中文名稱：熒光素標記生物素
          英文別名：Fluorescein-Biotin，F(xiàn)luorescein Isothiocyanate-Biotin，Biotin-FITC
          化學(xué)式：C??H??N?O?S（典型結(jié)構(gòu)）
          分子量：約 449.5 g/mol（視結(jié)構(gòu)而略有變化）
          結(jié)構(gòu)特征：由熒光素異硫氰酸酯（FITC）與生物素分子通過共價方式偶聯(lián)而成，具有雙重功能：熒光標記與生物素-親和素識別能力。
          FITC-Biotin 
          二、分子結(jié)構(gòu)與組成
          FITC-Biotin 是一種將熒光素（Fluorescein）與生物素（Biotin）通過穩(wěn)定的共價鍵連接的分子探針。典型結(jié)構(gòu)為 FITC 通過其異硫氰酸基團（–N=C=S）與 Biotin 上的氨基反應(yīng)，生成穩(wěn)定的硫脲鍵。
          FITC（Fluorescein isothiocyanate）：一種綠色熒光染料，廣泛用于標記蛋白質(zhì)、抗體、核酸等，具有良好的光穩(wěn)定性。
          Biotin：天然維生素B7，能夠與親和素（Avidin）或鏈霉親和素（Streptavidin）結(jié)合，親和力*強（Kd \~10??? M）。
           
          三、物化性質(zhì)
          項目
          描述
          外觀
          橙黃色或綠色固體粉末
          分子量
          ~449.5 Da（結(jié)構(gòu)不同略有差異）
          溶解性
          溶于DMSO、DMF、微量乙醇、甲醇，少量可溶于PBS、水
          熒光發(fā)射波長
          激發(fā)波長：495 nm；發(fā)射波長：519 nm（綠色熒光）
          穩(wěn)定性
          避光，干燥條件下穩(wěn)定；溶液狀態(tài)下易光降解
          儲存條件
          干燥粉末 -20°C，避光儲存；溶液建議 -20°C 避光并分裝使用，避免反復(fù)凍融


          純度
          通常 >95%（HPLC）
           
          四、優(yōu)勢與特征
          1. 雙重功能性：同時具備熒光檢測與生物素化親和功能；
          2. 高靈敏度：FITC強熒光信號可實現(xiàn)微量檢測；
          3. 高特異性：Biotin 可與 Streptavidin/NeutrAvidin 形成穩(wěn)定結(jié)合，廣泛用于拉下實驗、免疫熒光、示蹤等；
          4. 多用途兼容性：可用于生物素親和系統(tǒng)中與其他 Biotin 標記或結(jié)合蛋白共同使用；
          5. 小分子量：不會顯著影響靶標的生物活性或空間結(jié)構(gòu)。
           
          五、應(yīng)用領(lǐng)域
          1. 免疫熒光染色（IF）
          FITC-Biotin 可結(jié)合到鏈霉親和素（Streptavidin）標記的抗體或蛋白上，實現(xiàn)靶標的熒光成像。
          2. 細胞標記與追蹤
          可用于活細胞或固定細胞的表面標記，通過熒光顯微鏡觀察細胞功能或位置變化。
          3. 熒光拉下實驗（Pull-down）
          利用Biotin-Streptavidin系統(tǒng)進行靶分子的親和富集，F(xiàn)ITC熒光信號可用于追蹤或驗證結(jié)合情況。
          4. 核酸雜交
          在原位雜交實驗中，將 FITC-Biotin 探針用于標記 DNA 或 RNA 探針，實現(xiàn)高靈敏度的目標片段檢測。
          5. 熒光傳感器開發(fā)
          作為構(gòu)建熒光傳感平臺的功能性小分子，用于制備蛋白陣列、微球或微陣列芯片。
           
          六、參考文獻應(yīng)用實例
          1. Zhou et al., *Analytical Chemistry*, 2018
             > 利用FITC-Biotin結(jié)合鏈霉親和素-磁珠系統(tǒng)，實現(xiàn)miRNA的特異富集與熒光定量檢測。
          2. Lee et al., *Biosensors & Bioelectronics*, 2021
             > 開發(fā)生物素-熒光標記納米探針，實現(xiàn)癌細胞表面標志物的快速檢測與成像。
          3. Yamada et al., *Journal of Neurobiology*, 2002
             > 使用FITC-Biotin示蹤神經(jīng)元路徑，結(jié)合鏈霉親和素增強信號，實現(xiàn)高分辨率神經(jīng)成像。
           
          七、使用方法建議
          制備溶液：推薦使用無水DMSO或DMF配制母液（1–10 mM），分裝避光儲存；
          結(jié)合反應(yīng)：
            可用于標記含氨基生物分子，如蛋白質(zhì)、抗體；
            或通過親和素中介與其他生物素化物形成多聚體；
          操作注意事項：
            避免強光直射，實驗操作中使用黃光；
            使用后密封冷凍保存，防止光降解；
            實驗前進行結(jié)合活性驗證（可用鏈霉親和素-FITC標準比較信號強度）。
           
          八、結(jié)語
          FITC-Biotin 作為一種小分子熒光探針，結(jié)合了高親和生物素識別系統(tǒng)與強熒光發(fā)射能力，廣泛用于生命科學(xué)、藥物研究、分子診斷及納米技術(shù)等多個領(lǐng)域。其優(yōu)良的多功能性與靈活的結(jié)合方式使其成為構(gòu)建高靈敏度檢測平臺與靶向標記系統(tǒng)的理想選擇。
           
          以上資料由小編zhn提供，僅用于科研

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