以研究**靶向信號肽為例,介紹小動物活體成像實驗流程。本實驗人工給小鼠接種皮下**,然后制備cy7-信號肽復(fù)合體(探針),通過尾靜脈注射小鼠,在不同時間點做活體成像分析,觀察cy7-信號肽復(fù)合體(探針)在體內(nèi)的特異性分布。1) SPF級 BALB/C裸鼠,5~8 周齡,18~20克,自由進食、水。飼養(yǎng)1周后接種細胞,分組或混編分籠飼養(yǎng)。12小時光照/日,明暗交替。相對濕度50%±10%、溫度23±2℃。2) 細胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)CNE-1細胞(實驗室根據(jù)具體情況),取對數(shù)生長期,胰酶常規(guī)消化,離心,富集,利用無菌PBS清洗細胞,離心,富集,重復(fù)上述過程3次,最后用無菌PBS液調(diào)整細胞濃度為l×107個/ml,收集細胞于離心管內(nèi)。3) 細胞接種取0.1ml CNE-1細胞懸浮液接種于每只小鼠的雙后肢大腿。根部皮下,雙后肢皮下注射相同**細胞數(shù),每處1×106個細胞。4) 成瘤觀察繼續(xù)飼養(yǎng),觀察細胞接種后的生長狀況,大約5-6天后可見瘤塊,待約1-2 周后,**長至約0.5-0.8cm直徑,開始做體內(nèi)多肽靶向?qū)嶒灐?/span>1)動物分組、陰性對照、陽性對照根據(jù)具體實驗設(shè)置;2)實驗動物接種**后,注射熒光探針前,可根據(jù)實驗?zāi)康慕o藥或做其他處理。
小編zhn2021.05.07