125I放射同位素標(biāo)記單克隆抗體技術(shù)說明

125I標(biāo)記單克隆抗體技術(shù)

同位素標(biāo)記是一種重要的抗體標(biāo)記技術(shù)，牨977年Yalow等在放射免疫測定法所作突出貢獻(xiàn)而獲得醫(yī)學(xué)和生理學(xué) 諾貝爾獎。McAb標(biāo)記同位素后除應(yīng)用于放射免疫測定外，還可用于競爭結(jié)合試驗、體內(nèi)**定位等。

(一)　原理

氯胺桾即對甲苯碘氯胺鈉，在水溶液中生成次氯酸，為一種溫和氧化劑，當(dāng)加入到有蛋白質(zhì)和碘的弱堿水溶液中，可將I2氧化為I+并結(jié)合到氨基酸上。如標(biāo)記條件溫和，標(biāo)記后的McAb仍具有良好的結(jié)合活性，通過放射性同位素強(qiáng)度的測定可反映相應(yīng)抗原 的含量。

(二)　方法

　　　　　　在細(xì)胞凍存管內(nèi)加入純化的McAb100μg／100μl，

　　　　　　再加入10μl 0.05M磷酸緩沖液

　　　　　　再加入10μl(含1mCi)125I

　　　　　　　　　　↓

　　　　　　加入10μl氯胺-T(5mg／ml溶于0.05M

　　　　　　磷酸鹽緩沖液)，孵育時間不超過30秒

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　加入100μl偏重亞硫酸鈉(1.2mg／ml溶于

　　　　　　0.05M磷酸緩沖液 )

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　加入200μl　KI溶液(少許結(jié)晶KI溶于0.05M

　　　　　　磷酸緩沖液＋4％牛血清白蛋白)

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　用PD10柱(Sephadex G25)除去游離125I

　　　　　　用4％BSA　PBS洗脫

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　分部收集，0.5ml／管

　　每管取5μl進(jìn)行γ計數(shù)，計算標(biāo)記抗體的比活性和標(biāo)記率

　　　　　　　　　　　結(jié)合于McAb１２５I放射性強(qiáng)度(cpm)

　　　　標(biāo)記率(％)＝───────────────────

　　　　　　　　　　　　　　總放射性強(qiáng)度(cpm)

　　　　　　　　　　　　　　　　結(jié)合于某一管McAb上的放射性強(qiáng)度

　　　　比活性(μCi／μgMcAb)＝────────────────

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　某一管McAb總量

(三)　試劑器材

1.　純化后的McAb

2.　0.05M磷酸緩沖液，氯胺桾，偏重亞硫酸鈉，KI，BSA

3.　125I

4.　有通風(fēng)裝置的超凈臺，γ計數(shù)儀

5.　PD10柱(Sephadex G25)

(四)　注意事項

1.　嚴(yán)防同位素污染，工作人員必須穿著工作衣，戴口罩、帽子、手套。必須在嚴(yán)密的通風(fēng)櫥或通風(fēng)超凈臺中操作。操作前后對實驗室環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測。所用125I和標(biāo)記物應(yīng)妥善保管。

2.　如標(biāo)記細(xì)胞因子、激素等，應(yīng)選用更溫和的標(biāo)記方法，使保持更好的生物學(xué)活性。

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125l同位素    

125l放射同位素標(biāo)記標(biāo)記小分子化合物    

125l放射同位素標(biāo)記標(biāo)記抗體    

125l放射同位素標(biāo)記納米粒子    

125l放射同位素標(biāo)記大分子化合物    

125l放射同位素標(biāo)記標(biāo)記生物蛋白    

125l放射同位素標(biāo)記多肽    

125l放射同位素標(biāo)記前體化合物    

氟-18放射同位素標(biāo)記生物活性分子    

125l放射同位素標(biāo)記醫(yī)藥    

125l放射同位素標(biāo)記常規(guī)活性基團(tuán)    

125l放射同位素標(biāo)記特殊活性基團(tuán)    

125l放射同位素標(biāo)記熒光素    

125l放射同位素標(biāo)記磷脂    

125l放射同位素標(biāo)記高分子聚合物    

125l放射同位素標(biāo)記共聚物    

125l放射同位素標(biāo)記牛血清白蛋白    

125l放射同位素標(biāo)記人血清白蛋白    

125l放射同位素標(biāo)記轉(zhuǎn)鐵蛋白    

125l放射同位素標(biāo)記小麥胚凝集素    

125l放射同位素標(biāo)記鏈霉親和素    

125l放射同位素標(biāo)記肝素    

125l放射同位素標(biāo)記刀豆球蛋白    

125l放射同位素標(biāo)記過氧化氫酶    

125l放射同位素標(biāo)記胰島素    

125l放射同位素標(biāo)記絡(luò)蛋白    

125l放射同位素標(biāo)記卵清蛋白    

125l放射同位素標(biāo)記凝集素    

125l放射同位素標(biāo)記葡聚糖    

125l放射同位素標(biāo)記半乳糖化殼聚糖化合物    

125l放射同位素標(biāo)記右旋糖酐    

125l放射同位素標(biāo)記溶菌酶    

125l放射同位素標(biāo)記海藻酸鈉    

125l放射同位素標(biāo)記殼聚糖    

125l放射同位素標(biāo)記半乳糖    

125l放射同位素標(biāo)記甘露糖    

125l放射同位素標(biāo)記葡萄糖    

125l放射同位素標(biāo)記乳糖基    

125l放射同位素標(biāo)記黃原膠    

125l放射同位素標(biāo)記巖藻多糖    

125l放射同位素標(biāo)記木聚糖    

125l放射同位素標(biāo)記纖維二糖    

125l放射同位素標(biāo)記香菇多糖    

125l放射同位素標(biāo)記硫酸軟骨素    

125l放射同位素標(biāo)記辣根過氧化氫酶    

125l放射同位素標(biāo)記**或小分子    

125l放射同位素標(biāo)記甲氨蝶呤    

125l放射同位素標(biāo)記紫杉醇    

125l放射同位素標(biāo)記阿霉素    

125l放射同位素標(biāo)記順鉑    

125l放射同位素標(biāo)記環(huán)丙沙星    

125l放射同位素標(biāo)記甲硝唑    

125l放射同位素標(biāo)記雷替曲塞    

125l放射同位素標(biāo)記培美曲塞    

125l放射同位素標(biāo)記磺胺地索辛    

125l放射同位素標(biāo)記茴香酰胺    

125l放射同位素標(biāo)記雌性激素    

125l放射同位素標(biāo)記金剛烷    

125l放射同位素標(biāo)記阿奇霉素    

125l放射同位素標(biāo)記氮川三乙酸-鎳    

125l放射同位素標(biāo)記多肽RGD    

125l放射同位素標(biāo)記cRGD    

125l放射同位素標(biāo)記Angiopep    

125l放射同位素標(biāo)記TAT    

125l放射同位素標(biāo)記Octreotide    

125l放射同位素標(biāo)記SP94    

125l放射同位素標(biāo)記CPP    

125l放射同位素標(biāo)記CTT2    

125l放射同位素標(biāo)記CCK8    

125l放射同位素標(biāo)記GEII    

125l放射同位素標(biāo)記RVG29    

125l放射同位素標(biāo)記YIGSR    

125l放射同位素標(biāo)記WSW ( WSWGPYSC)    

125l放射同位素標(biāo)記Pep-1 (CGEMGWVRC)    

125l放射同位素標(biāo)記RVG29MMPs(GGGGCTTHWGFTLC)    

125l放射同位素標(biāo)記NGR    

125l放射同位素標(biāo)記R8    

125l放射同位素標(biāo)記氨基酸    

125l放射同位素標(biāo)記聚氨基酸    

125l放射同位素標(biāo)記聚賴氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記聚鳥氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記聚精氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記聚肌氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記聚天冬氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記聚谷氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記組氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記谷氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記賴氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記蘇氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記亮氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記纈氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記色氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記精氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記鳥氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記天冬氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記絡(luò)氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記甘氨酸    

125l放射同位素標(biāo)記絲氨酸    

上述產(chǎn)品定制僅用于科研，不可用于人體實驗!

wyf 04.14