角膜是眼球的最外層部分,能夠?qū)⒐饩劢沟窖蹆?nèi)神經(jīng)感覺系統(tǒng)上并為眼球提供保護(hù),然而角膜損傷或疾病會(huì)迅速導(dǎo)致角膜瘢痕和變薄,**導(dǎo)致失明。角膜移植能****角膜盲,但存在角膜供體短缺等問題?朔悄ひ浦蚕拗频囊粋(gè)**的方法是使用生物材料來(lái)替代受損的角膜組織。通過生物正交應(yīng)變反應(yīng)促進(jìn)的疊氮化物-炔烴環(huán)加成(SPACC)反應(yīng)來(lái)交聯(lián)透明質(zhì)酸和膠原蛋白的方法,制備了一種可流入角膜缺陷并在幾分鐘內(nèi)交聯(lián)的新型水凝膠。
**,用疊氮化物和二苯并環(huán)辛炔胺(DBCO)在N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)催化作用下對(duì)透明質(zhì)酸和膠原進(jìn)行改性(圖1a, b)。通過吸光度光譜對(duì)DBCO和疊氮化物進(jìn)行了定量分析,結(jié)果表明DBCO的取代度為4.63%,而疊氮化物的取代度為1.66%。然后將透析后的疊氮化透明質(zhì)酸(HA-azide)與接枝BDCO的膠原(Col-DBCO)混合,通過SPAAC反應(yīng)交聯(lián),制備透明質(zhì)酸-膠原水凝膠(圖1c)。
接著,在體積比為1:1的情況下,通過調(diào)控不同濃度的HA-azide與Col-DBCO研究了水凝膠的力學(xué)性能。當(dāng)Col-DBCO保持在3 mg/mL時(shí),水凝膠的儲(chǔ)存和損失模量隨HA-azide的增加而增加,同樣的,當(dāng)HA-azide濃度保持在50 mg/mL時(shí),Col-DBCO含量從1增加到3 mg/mL時(shí),兩個(gè)模量也增加。其中HA-azide的**濃度為25 mg/mL和1.5 mg/mL Col-DBCO(HA50-Col3)水凝膠更硬,更接近角膜基質(zhì)(圖2a-d)。
我們將兔角膜作為角膜缺陷填充物,測(cè)量了HA50-Col3水凝膠的力學(xué)性能。為了排除膠原蛋白纖維斷裂的負(fù)面影響,使用完整的角膜(紅色圓圈)和受傷的角膜(藍(lán)色圓圈)作為陽(yáng)性和陰性對(duì)照。各樣品的儲(chǔ)存模量和損失模量隨頻率的增加而增加,損傷角膜的儲(chǔ)存和損失模量約為完好角膜的20%,當(dāng)填充HA50-Col3水凝膠后,模量增加到完整角膜填充的55%左右。
為了進(jìn)一步了解HA-Col水凝膠促進(jìn)角膜創(chuàng)面愈合的潛力,研究者使用板角膜創(chuàng)面模型進(jìn)行了體內(nèi)研究。**,在角膜中央用特制的3.5毫米真空環(huán)鉆損傷角膜,然后將水凝膠加入創(chuàng)面。原位形成凝膠后在7天的傷口愈合過程中,未見到兔角膜上水凝膠的腫脹或收縮且受傷的角膜始終保持透明。同時(shí),角膜切除區(qū)域與相鄰的正常角膜之間具有平滑的過渡,一周后角膜曲率完全恢復(fù)。相反,在不使用凝膠的情況下,角膜切除區(qū)域的厚度則比鄰近的角膜薄,并且在角膜中央呈凹陷狀(圖6)。角膜切片免疫熒光染色顯示在HA50-Col3處理后的角膜上分別有再生上皮組織和水凝膠兩層,而沒有應(yīng)用水凝膠的角膜上只有單層的上皮組織。與此同時(shí),角膜切除區(qū)角質(zhì)細(xì)胞比正常角膜和水凝膠處理傷后的角膜細(xì)胞更活躍,而且HA50-Col3顯著降低了α-SMA的表達(dá),避免形成肌纖維細(xì)胞和角膜瘢痕(圖7)?傊琀A50-Col3不會(huì)引起明顯的成肌纖維細(xì)胞活化,并且可以支持再生的上皮細(xì)胞層內(nèi)的緊密連接,是具有潛力的作為角膜基質(zhì)替代的候選材料。
西安pg電子官方生物目前的產(chǎn)品目錄包括點(diǎn)擊化學(xué)工具,如DBCO、四嗪、TCO、BCN和環(huán)丙烯等,生物素連接物、PEG連接物、肽連接物、葡萄糖醛酸連接物、光解連接物、染料探針連接物和葉酸PEG連接物。
DBCO-PEG-NH2 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-氨基
DBCO-PEG-Amine 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-氨基
DBCO-PEG-COOH 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-羧酸
DBCO-PEG-carboxyl 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-羧酸
DBCO-PEG-MAL 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-馬來(lái)酰亞胺
DBCO-PEG-Maleimide 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-馬來(lái)酰亞胺
DBCO-PEG-NHS 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-N-羥基琥珀酰亞胺
DBCO-PEG-N3 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-疊氮
DBCO-PEG-azide 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-疊氮
DBCO-PEG-Alkyne 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-炔基
DBCO-PEG-SH 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-炔基
DBCO-PEG-Thiol 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-炔基
DBCO-PEG-Biotin 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-生物素
DBCO-PEG-CHO 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-醛基
DBCO-PEG-aldehyde 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-乙醛
DBCO-PEG-SS-OPSS 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-鄰吡啶二硫 巰基吡啶
DBCO-PEG-OH 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-羥基
DBCO-PEG-hydroxyl 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-羥基
DBCO-PEG-Hydrazide 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-;
DBCO-PEG-HZ 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-酰基
DBCO-SS-PEG-Silane 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-硅烷
DBCO-PEG-Acrylates 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-丙烯酸酯
DBCO-PEG-ACRL 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-丙烯酸酯
DBCO-PEG-LA 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-硫辛酸
DBCO-PEG-Tosyl 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-甲苯磺酸酯
DBCO-PEG-Aminooxy 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-氨甲基
DBCO-PEG-NPC 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-硝基苯碳酸鹽
DBCO-PEG-Epoxides 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-環(huán)氧化物
DBCO-PEG-EPOX 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-環(huán)氧化物
DBCO-PEG-Acrylamide 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-丙烯酰胺
DBCO-PEG-Bromide 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-溴化物
DBCO-PEG-Br 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-溴化物
DBCO-PEG-Methacrylate 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-甲基丙烯酸酯
DBCO-PEG-MA 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-甲基丙烯酸酯
DBCO-PEG-DBCO 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二苯基環(huán)辛炔
DBCO-PEG-TCO 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-TCO
DBCO-PEG-TZ 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-四嗪
DBCO-PEG-Tetrazine 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-四嗪
DBCO-PEG-Folate 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-葉酸
DBCO-PEG-FA 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-葉酸
DBCO-PEG-CHEMS 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-半琥珀酸膽固醇
DBCO-PEG-Phenyl 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-苯基
DBCO-PEG-acid 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-磷酸
DBCO-PEG-PFP 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-五氟苯酚
DBCO-PEG-Benzaldehyde 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-苯甲醛
DBCO-PEG-Mesylate 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-甲磺酸酯
DBCO-PEG-TPP 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-磷酸三苯酯
DBCO-SS-PEG-Dopamine 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-多巴胺
DBCO-ss-PEG-Ferrocene 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二茂鐵
DBCO-SS-PEG-GA 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-甘草次酸
DBCO-PEG-Cyclodextrin 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-環(huán)糊精
DBCO-PEG-SS-CD 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-環(huán)糊精
DBCO-PEG-GPC 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-甘磷酸膽堿
DBCO-PEG-SPDP 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-3-(2-吡啶二硫代)丙酸N-羥基琥珀酰亞胺酯
DBCO-SS-PEG-DOTA 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-四氮雜環(huán)十二烷四乙酸
DBCO-PEG-NOTA 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-NOTA
DBCO-PEG-DTPA 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二乙基三胺五乙酸
DBCO-PEG-TRITC 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-四甲基羅丹明
DBCO-PEG-6-FAM 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-6-羧甲基熒光素
DBCO-PEG-FITC 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-異硫氰基熒光素
DBCO-PEG-CY3 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-菁染料
DBCO-PEG-CY5 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-菁染料
DBCO-PEG-CY5.5 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-菁染料
DBCO-PEG-CY7 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-菁染料
DBCO-PEG-CY7.5 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-菁染料
DBCO-PEG-Rhodamine B 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-羅丹明B
DBCO-PEG-ICG 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-吲哚菁綠
DBCO-PEG-Comarin 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-香豆素
DBCO-PEG-Bodipy 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-氟化硼二吡咯
DBCO-PEG-BDP 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-氟化硼二吡咯
DBCO-PEG-HMME 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-血卟啉單甲醚
DBCO-PEG-Ce6 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二氫卟吩
DBCO-PEG-DSPE 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二硬脂;字R掖及
DBCO-PEG-DPPE 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二棕櫚酰基磷脂酰乙醇胺
DBCO-PEG-DOPE 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二油;字R掖及
DBCO-PEG-DMPE 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺
DBCO-PEG-DLPE 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二月桂;字R掖及
DBCO-PEG-Cholesterol 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-膽固醇
DBCO-PEG-DMG 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二肉豆蔻酰-sn-甘油
DBCO-PEG-DPG 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-雙棕櫚酸甘油酯
DBCO-PEG-DPPS 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-二棕櫚酰磷脂酰絲氨酸
DBCO-PEG-BSA 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-牛血清白蛋白
DBCO-PEG-HAS 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-人血清白蛋白
DBCO-PEG-Transferrin 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-轉(zhuǎn)鐵蛋白
DBCO-PEG-TF 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-轉(zhuǎn)鐵蛋白
DBCO-PEG-WGA 二苯基環(huán)辛炔-聚乙二醇-小麥胚凝集素
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