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          磁性微球相比瓊脂糖微球的蛋白純化的優(yōu)勢
          發(fā)布時間:2021-02-01     作者:wyf   分享到:

          免疫沉淀、ChIP、蛋白互作、親和純化等實(shí)驗(yàn)里,核心的環(huán)節(jié)就是用微球進(jìn)行目標(biāo)蛋白的釣取純化 ,而常用的就是各種包被的瓊脂糖微球,而隨著大家對回收率、純度以及實(shí)驗(yàn)便捷性的要求提升,越來越多的人開始選用磁性微球。

          磁性微球相比瓊脂糖微球的優(yōu)勢:

          回收率高

          瓊脂糖純化中,瓊脂糖珠在離心之后,棄去上清。在吸液過程中,為了盡可能移去上清,往往會吸走一部分瓊脂糖,這樣就可能損失一部分目的蛋白。同時,瓊脂糖珠在離心過程中也可能破裂,這樣就又損失了一部分目的蛋白。

          磁珠純化中,攜帶目的蛋白的磁珠通過磁性吸附在管壁上,此時吸取上清不會捎帶走帶有目的蛋白的磁珠,而磁珠也不需要應(yīng)付頗具考驗(yàn)的離心步驟,這樣雙管齊下就保證了磁珠比瓊脂糖珠有更高的回收率,對于蛋白互作、ChIP實(shí)驗(yàn)來說,更容易獲得可靠的檢出結(jié)果。而對于RIP這樣對于檢測靈敏度要求更高的實(shí)驗(yàn)來說,基于磁珠的純化是**推薦的途徑。

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          特異性好

          瓊脂糖純化中,瓊脂糖珠本身結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,容易非特異性結(jié)合蛋白和DNA,對于蛋白互作研究或者ChIP實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生非特異性的干擾。此外,在離心去除上清的過程中,也可能由于吸取上清不徹底,從而殘留一些實(shí)際未與微球結(jié)合的蛋白/DNA,從而產(chǎn)生非特異性結(jié)果。

          磁珠純化中,由于磁珠表面光滑,非特異性結(jié)合率**,因此背景比瓊脂糖低的多。另外由于磁珠純化時,去除上清更加徹底,殘留的未結(jié)合蛋白/DNA對結(jié)果的干擾也能被去除。

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          瓊脂糖微球的非特異性結(jié)合

          瓊脂糖天然的非特異性結(jié)合屬性往往會給實(shí)驗(yàn)帶來意想不到的背景,需要**設(shè)置多個對照和反復(fù)實(shí)驗(yàn)來進(jìn)行核實(shí)與驗(yàn)證。而對于ChlP實(shí)驗(yàn)來說,也不能直接使用普通瓊脂糖珠,而是需要先用鮭魚精DNA等試劑進(jìn)行封閉

           

          操作簡便速度快

          IP實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖珠、抗體、目標(biāo)蛋白往往需要很長時間的孵育才能充分進(jìn)行結(jié)合。而使用磁珠后,往往只需要更短的時間就可以完成充分的結(jié)合,這**的提升了實(shí)驗(yàn)速度。

          同時,磁珠無需進(jìn)行離心,可以使用磁力架進(jìn)行“秒速”分離,可以迅速進(jìn)行后續(xù)的去上清、清洗步驟。再也不用盯著瓊脂糖珠的固液界面小心翼翼的進(jìn)行上清分離了。

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          pg電子官方供應(yīng)

          基礎(chǔ)磁珠二氧化硅磁珠
          瓊脂糖磁珠
          聚合物磁珠
          葡聚糖納米磁珠
          標(biāo)記免疫與捕獲磁珠生物配體快速偶聯(lián)磁珠
          免疫沉淀試劑盒
          鏈霉親和素磁珠
          蛋白純化磁珠抗體純化磁珠
          His-tag蛋白純化磁珠
          GST融合蛋白純化磁珠
          Strep-tag II蛋白純化磁珠
          肝素磁珠
          DEAE磁珠
          核酸提取磁珠游離DNA提取試劑盒
          唾液基因組提取試劑盒
          糞便核酸提取試劑盒
          血液基因組提取試劑盒
          病毒DNA/RNA提取試劑盒
          DNA片段篩選
          PCR產(chǎn)物純化試劑盒
          凝膠回收試劑盒
          質(zhì)粒DNA小量抽提試劑盒
          Oligo dT磁珠

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          wyf 02.01

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