免疫磁珠細(xì)胞分選即磁珠分選技術(shù)常見問題

磁珠分選，也被稱為免疫磁珠細(xì)胞分選，包括使用針對(duì)特定細(xì)胞表面抗原的抗體標(biāo)記細(xì)胞進(jìn)行選擇或去除。被標(biāo)記的細(xì)胞與磁珠交聯(lián)，一旦被置于磁場(chǎng)中，即可被吸附。

由于其快速性和簡(jiǎn)便性，磁珠分選是科學(xué)家分離高純度的特定細(xì)胞亞群較常用的方法之一。

關(guān)于磁珠細(xì)胞分選的常見問題

1. 應(yīng)該使用磁珠分選還是流式分選？

磁珠分選和流式分選（FACS）是較常用的兩種分離特定細(xì)胞群的方法。兩種方法的選擇取決于您將進(jìn)行何種下游應(yīng)用。

相對(duì)于復(fù)雜的流式分選，磁珠分選：

簡(jiǎn)單、快捷，較快8分鐘就可以完成分選，獲得目的細(xì)胞

無(wú)需昂貴精密的儀器，在生物安全柜即可做到無(wú)菌分選

沒有高壓液流和激光對(duì)細(xì)胞的損傷，分選的細(xì)胞活性更高

無(wú)需**人員操作，無(wú)需預(yù)約排隊(duì)，可自主安排時(shí)間

當(dāng)然，磁珠分選和流式分選也可結(jié)合使用。在進(jìn)行流式分選前，使用磁珠分選技術(shù)預(yù)富集您的樣本，能縮短細(xì)胞分選的時(shí)間、提高細(xì)胞活性，特別是在樣本量較大或需要分選稀少的細(xì)胞類型時(shí)。

2. 應(yīng)該選擇有柱式還是無(wú)柱式的磁珠分選方法？

免疫磁珠分選有兩種方式：有柱式分選和無(wú)柱式分選。

所謂有柱式磁珠分選，即被磁珠標(biāo)記的細(xì)胞需要流經(jīng)一個(gè)置于磁場(chǎng)內(nèi)的分離柱從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目的細(xì)胞分離的過程。這個(gè)分離柱內(nèi)由一些微小鐵珠構(gòu)成，當(dāng)這些鐵珠被置于磁場(chǎng)中時(shí)會(huì)被磁化，從而產(chǎn)生一個(gè)可吸附被磁珠標(biāo)記的細(xì)胞的局部磁場(chǎng)。當(dāng)使用正選時(shí)（圖1），未被磁珠標(biāo)記的非目的細(xì)胞可以通過分離柱，而被磁珠標(biāo)記的目的細(xì)胞則保留在分離柱中。當(dāng)將分離柱移出磁場(chǎng)后，可通過緩沖液洗脫得到目的細(xì)胞。

然而在有柱式磁珠分選流程中，需要多次的洗滌細(xì)胞以避免分離過程中的交叉污染，并且每次分選時(shí)都需要更換新的分離柱，因此這種分選方法使得實(shí)驗(yàn)成本更高，實(shí)驗(yàn)流程更復(fù)雜，且費(fèi)時(shí)費(fèi)力。此外，因?yàn)槎轮�子而損失珍貴樣本的情況在有柱式磁珠分選的過程中非常見，特別是當(dāng)使用的組織樣本含有大量的細(xì)胞碎片時(shí)。

圖1. 有柱式磁珠分選的正選操作流程

所謂無(wú)柱式磁珠分選，即直接將被磁珠標(biāo)記的樣本置于磁場(chǎng)內(nèi)從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目的細(xì)胞分離的過程。被磁珠標(biāo)記的細(xì)胞由于磁場(chǎng)的作用被吸附在試管壁上。而未被標(biāo)記的細(xì)胞則可通過傾倒出或移液器吸出。將試管移出磁場(chǎng)后，被標(biāo)記的細(xì)胞則會(huì)從試管壁上脫離，懸浮于試管內(nèi)。當(dāng)使用正選時(shí)（圖2），被標(biāo)記的目的細(xì)胞被留在試管內(nèi)，可立即用于下游應(yīng)用。

圖2. 無(wú)柱式磁珠細(xì)胞分選的正選操作流程

3. 應(yīng)該選擇正選還是負(fù)選？

磁珠分選又分為正選和負(fù)選（圖3）。在選擇磁珠分選方法前，我們先來了解什么是正選，什么是負(fù)選。

免疫磁珠陽(yáng)性分選，也被稱為正選，是指使用抗體偶聯(lián)磁珠來標(biāo)記目的細(xì)胞以達(dá)到將其收集的目的。樣本在磁極中孵育后，由于抗體與磁珠相連使得被標(biāo)記的細(xì)胞保留在試管中。正選具有以下特點(diǎn)：

分離的細(xì)胞純度高

分離的細(xì)胞通常與抗體和磁珠相連

抗體混合物可與目的細(xì)胞表面特定的標(biāo)記相連

可從負(fù)選后的細(xì)胞中分離其他細(xì)胞群

免疫磁珠陰性分選，也被稱為負(fù)選，是指使用抗體偶聯(lián)磁珠來標(biāo)記非目的細(xì)胞以達(dá)到將其去除的目的。樣本在磁極中孵育后，由于抗體與磁珠相連使得被標(biāo)記的非目的細(xì)胞保留在試管中，而目的細(xì)胞則可通過傾倒或移液器吸出來收集。目的細(xì)胞沒有結(jié)合特異性抗體，因此無(wú)法被磁珠標(biāo)記。負(fù)選具有以下特點(diǎn)：

目的細(xì)胞未被磁珠標(biāo)記

較小化樣本處理步驟從而使得操作流程更快更簡(jiǎn)單

抗體混合物只結(jié)合所有非目的細(xì)胞

圖3. 無(wú)柱式磁珠細(xì)胞分選中負(fù)選與正選的操作流程

選擇正選或負(fù)選進(jìn)行細(xì)胞分選實(shí)驗(yàn)取決于您的下游應(yīng)用。對(duì)于大部分的下游應(yīng)用，正選中被標(biāo)記了抗體和EasySep?磁珠的細(xì)胞并不會(huì)影響下游實(shí)驗(yàn)。更不會(huì)激活細(xì)胞。

產(chǎn)品供應(yīng)：

功能化磁珠    羥基磁珠    

羧基磁珠    

氨基磁珠    

環(huán)氧磁珠    

甲苯磺�；�磁珠    

提取核酸磁珠及配套試劑    羥基磁珠（二氧化硅磁珠）    

羧基磁珠    

DNA片段分選純化磁珠    

oligo（dT）磁珠    

PCR產(chǎn)物純化磁珠    

多合一核酸提取試劑盒-磁珠法    

鏈霉親和素磁珠    

全基因組核酸提取結(jié)合液    

游離循環(huán)/病毒核酸提取裂解結(jié)合液    

免疫檢測(cè)磁珠及配套試劑    羧基磁珠    

氨基磁珠    

環(huán)氧磁珠    

鏈霉親和素磁珠    

ALP堿性磷酸酶化學(xué)發(fā)光底物    

Flag標(biāo)簽抗體磁珠    

GST標(biāo)簽蛋白純化磁珠（GSH磁珠）    

His-tag標(biāo)簽蛋白純化磁珠（鎳磁珠）    

ProteinA磁珠    

ProteinG磁珠    

StrepTactin磁珠（純化Strep tag II標(biāo)簽蛋白）    

磁珠偶聯(lián)抗體(蛋白）封閉液    

磁珠偶聯(lián)抗體（蛋白）試劑盒    

電化學(xué)發(fā)光鏈霉親和素磁珠    

甲苯磺�；�磁珠    

堿性磷酸酶    

抗FITC熒光素抗體磁珠    

免疫磁珠保存液    

進(jìn)口品牌磁珠    羧基磁珠/Agliant鏈霉親和素磁珠    

羧基磁珠和Merck鏈霉親和素磁珠    

Sera-Mag? Magnetic SpeedBeads? Carboxylate-Modified Particles    

抗體磁珠    CD2抗體磁珠    

CD3抗體磁珠    

CD4抗體磁珠    

CD8抗體磁珠    

CD14抗體磁珠    

CD15抗體磁珠    

CD19抗體磁珠    

CD25抗體磁珠    

CD31抗體磁珠    

CD34抗體磁珠    

CD45抗體磁珠    

Flag標(biāo)簽抗體磁珠    

GFP標(biāo)簽抗體磁珠    

GST標(biāo)簽抗體磁珠    

HA Tag抗體磁珠    

His標(biāo)簽抗體磁珠    

HSV Tag抗體磁珠    

Myc標(biāo)簽抗體磁珠    

抗FITC熒光素抗體磁珠    

山羊抗兔IgG抗體磁珠    

山羊抗小鼠IgG抗體磁珠    

鼠抗人IgG抗體磁珠    

鼠抗兔IgG抗體磁珠    

兔抗人IgG抗體磁珠    

兔抗鼠IgG抗體磁珠    

磁珠磁力架    0.2ml八聯(lián)排管磁力架    

0.4ml/0.5ml磁力架    

1.5ml磁力架/2ml磁力架    

2ml磁力架（平底）    

4ml/5ml磁力架（尖底和圓底）    

10ml磁力架    

15ml磁力架    

50ml磁力架    

96孔PCR板磁力架    

96孔酶標(biāo)板磁力架    

96孔深孔板磁力架（1.2ml和2.2ml）    

磁力板（試管專用）    

磁力架多管混勻器    

多功能磁力架    

萬(wàn)能磁珠控溫混勻器    

偶聯(lián)標(biāo)記技術(shù)服務(wù)    抗體（蛋白）和磁珠的標(biāo)記    

磁珠和寡核苷酸探針的標(biāo)記    

小分子和抗體（蛋白）的標(biāo)記    

抗體（蛋白）的純化    

抗體    HRP標(biāo)記的抗體    

Biotin標(biāo)記的抗體    

Fitc標(biāo)記的抗體    

AU標(biāo)記的抗體    

所有常見二抗    

所有常見一抗    

抗熒光素抗體（FITC抗體）    

HRP標(biāo)記小鼠抗人IgG二抗    

HRP標(biāo)記山羊抗人IgG二抗    

AP標(biāo)記山羊抗人IgG二抗    

AP標(biāo)記小鼠抗人IgG二抗    

c-Myc / Myc Tag    

CBP Tag    

E2b Tag    

Flag / DYKDDDDK Tag    

GFP pAb    

GFP Tag    

GST Tag    

HA Tag    

His Tag    

HPC4    

HSV Tag    

MBP Tag    

SUMO Tag    

T7 Tag    

Tag-100-Tag    

V5 Tag    

VSV-G Tag    

層析空柱    不銹鋼空色譜柱    

有機(jī)玻璃層析空柱加工定做    

上述產(chǎn)品及其復(fù)雜定制服務(wù)pg電子官方生物均可供應(yīng)，僅用于科研！

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