納米材料在生物電子學(xué)中有廣泛的應(yīng)用。在傳感領(lǐng)域,納米器件的表面修飾已得到很好的應(yīng)用,在本文中,作者介紹了一種通過(guò)將細(xì)胞穿膜肽——一種從人類(lèi)免疫缺陷病毒1中分離出的反式激活轉(zhuǎn)錄激活劑(TAT)與硅納米線(Si NW)表面相連接,從而促使NW自發(fā)進(jìn)入原代神經(jīng)元細(xì)胞的生物學(xué)方法。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程及結(jié)果:
**,通過(guò)納米金原子簇催化的氣液固法合成了Si NW,隨后用(3-氨基丙基)-三乙氧基硅烷處理,得到一級(jí)胺封端的單層膜,再用1-乙基-3-(3(二甲氨基)丙基)碳二亞胺將熒光標(biāo)記物STV與一級(jí)胺單層膜連接,最后在TAT溶液中處理,得到TAT表面修飾的TAT-NW。
將小鼠海馬體細(xì)胞培養(yǎng)2周后,將5 μg TAT-NW放置于樣品中,在37 ℃下培養(yǎng)20小時(shí),并用TAT修飾的STV-NW以相同的方式做對(duì)照實(shí)驗(yàn)。作者利用共聚焦顯微鏡成像技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)行了觀察,發(fā)現(xiàn)被TAT修飾的NW可以進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞,而未被修飾的STV-NW則沒(méi)有進(jìn)入細(xì)胞。
為了運(yùn)用活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像技術(shù)進(jìn)行觀察,我們?cè)O(shè)計(jì)了如圖2-a所示的培養(yǎng)皿,將物鏡從洞中插入,實(shí)現(xiàn)了對(duì)樣品的實(shí)時(shí)觀察。在100倍放大下,每隔10分鐘進(jìn)行一次共聚焦顯微鏡成像,得到了如圖2-b的結(jié)果。圖像表明,NW進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程在NW與細(xì)胞膜接觸后的10到20分鐘以?xún)?nèi)開(kāi)始,在30至40分鐘以?xún)?nèi)完成。
為了檢測(cè)這一方法的普適性,我們利用原代背根神經(jīng)節(jié)(DRG)細(xì)胞進(jìn)行了相同的實(shí)驗(yàn),得到了與在海馬體細(xì)胞中相似的實(shí)驗(yàn)結(jié)果:被TAT表面修飾的NW可以自發(fā)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),且NW進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程在NW與細(xì)胞膜接觸后的10分鐘以?xún)?nèi)開(kāi)始,在30分鐘以?xún)?nèi)完成。
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