外泌體介導(dǎo)的CRISPR-Cas9遞送
在CRISPR序列的指導(dǎo)下,Cas9酶可以在細(xì)胞中以前所未有的精度、效率和靈活性編輯基因組DNA。但是,離體設(shè)計(jì)的CRSPR-Cas9系統(tǒng)需要遞送到目標(biāo)細(xì)胞和生物中進(jìn)行基因**。CRISPR-Cas9系統(tǒng)的傳遞可通過(guò)物理相互作用、化學(xué)修飾和生物載體實(shí)現(xiàn)。CRISPR-Cas9系統(tǒng)可通過(guò)脂質(zhì)雙分子層中的短暫間隙被輸送到細(xì)胞中,該間隙由物理方法引起,例如電穿孔、流體動(dòng)力注射、膜變形等。盡管簡(jiǎn)單易行,但可能對(duì)細(xì)胞膜造成不可逆的生理?yè)p傷。CAS9-sgRNA的化學(xué)修飾還將使它能夠傳遞到細(xì)胞,或者諸如噬菌體、病毒和細(xì)胞外囊泡等生物載體可以介導(dǎo)CRISPR-Cas系統(tǒng)向細(xì)胞的傳遞。
外泌體作為CRISPR-Cas9質(zhì)粒的載體
與病毒載體相比,來(lái)自某些細(xì)胞來(lái)源的外泌體可以選擇性地將貨物遞送至**組織。Kim等報(bào)道稱(chēng)**細(xì)胞來(lái)源的外泌體可以將CRISPR-Cas9系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)至靶**。
用于CRISPR-Cas9遞送的工程外泌體
天然外泌體并非設(shè)計(jì)來(lái)傳遞大分子,例如質(zhì)粒。因此,外泌體中質(zhì)粒的負(fù)荷低。然后需要對(duì)外泌體進(jìn)行工程改造,以提高質(zhì)粒的效率和容量。工程外泌體還賦予了這些轉(zhuǎn)運(yùn)納米顆粒以靶向能力,可將貨物轉(zhuǎn)運(yùn)至特定細(xì)胞或組織。在外泌體表面表達(dá)的標(biāo)志蛋白CD63和CD9通常被選作外泌體工程的靶蛋白。
外泌體-脂質(zhì)體雜交體,用于基因傳遞
外泌體的納米級(jí)尺寸(40–160 nm)使其成為小型**劑(例如化合物、siRNA和miRNA)的合格載體。對(duì)于大分子,例如小大小為5–6 kb的CRISPR-Cas9表達(dá)質(zhì)粒,天然外泌體的容量仍然相對(duì)較低。另一方面,脂質(zhì)體能夠包封和傳遞大質(zhì)粒,但由于脂質(zhì)的非天然性質(zhì),具有較高的細(xì)胞毒性。外泌體膜的脂質(zhì)雙層與脂質(zhì)體的融合形成了外泌體-脂質(zhì)體雜合體,從而可以包裹和遞送大型DNA分子,例如CRISPR-Cas9表達(dá)質(zhì)粒,還減輕了脂質(zhì)體的毒性問(wèn)題(圖1)。因此,外泌體-脂質(zhì)體的雜交擴(kuò)大了外泌體在**輸送中的應(yīng)用范圍。
將大核酸封裝在外泌體或外泌體來(lái)源的囊泡中
產(chǎn)品供應(yīng):
人骨髓來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞分泌外泌體
類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎外泌體
大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體
小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體(ADMSC-Exo)
小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(mASCs)來(lái)源外泌體
聚乙二醇(PEG)沉淀法提取關(guān)節(jié)液來(lái)源外泌體
外泌體蛋白質(zhì)類(lèi)微RNAs生物學(xué)標(biāo)記
外泌體核酸適配體脂質(zhì)體復(fù)合載藥系統(tǒng)
上述產(chǎn)品與相關(guān)檢測(cè)服務(wù)均可提供,僅用于科研!
wyf 01.15