外泌體概要

外泌體（Exosome）是指經(jīng)由細(xì)胞內(nèi)的囊泡運(yùn)輸，從多泡體(Multivesicular body，MVB) 排出到細(xì)胞外的直徑為30～100 nm左右的細(xì)胞外囊泡（Extracellular vesicle，EV）。

外泌體的膜表面上多表達(dá)一種四次跨膜蛋白（Tetraspanin），已知CD9與CD63分子為一般外泌體的標(biāo)志物。外泌體內(nèi)部含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等。被分泌到細(xì)胞外后，經(jīng)由血液、尿液和唾液等體液被相鄰或遠(yuǎn)離的組織吸收，從而發(fā)揮著細(xì)胞間信息傳遞載體的作用。

最近的研究證明外泌體中存在miRNA后，外泌體由來的miRNA的分析與細(xì)胞、組織特異性、以及與疾病間的聯(lián)系引起了人們的廣泛關(guān)注�，F(xiàn)在，在以**癥等為代表的各類疾病中，利用外泌體由來的分子開發(fā)診斷試劑或?qū)⑵渥鳛?*開發(fā)靶點(diǎn)，或是將外泌體作為**釋放系統(tǒng)的工具加以利用，這些聚焦于外泌體的研究正在不斷發(fā)展。

外泌體的分離方法

超速離心法

多聚物沉淀法

免疫沉淀法

方法

? 利用分子的大小比重物理法離心

? 使用多聚物的沉淀法

? 運(yùn)用磁珠法特異性吸附外泌體表面抗原進(jìn)行沉淀分離

優(yōu)點(diǎn)

? 至今為止常用的方法

? 可大量提取

? 可使用的樣品種類較多

? 低成本

? 操作簡單

? 時(shí)間較短

? 不需要特別的儀器

? 操作簡單

? 時(shí)間較短

? 雜質(zhì)較少，純度高

? 可以使用膜上蛋白對應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行回收

缺點(diǎn)

? 操作比較繁雜，時(shí)間較長（半天～兩天）

? 雜質(zhì)較多

? 根據(jù)使用的離心管的材料，可能會因壁上的吸附造成損耗

? 較難同時(shí)檢測不同樣品

? 需要超速離心機(jī)

? 雜質(zhì)較多

? 從血清血漿中回收外泌體需要分別使用不同的試劑進(jìn)行回收

? 外泌體的回收效果依靠抗體的性能