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          小鼠體內(nèi)光學成像的原理和實驗步驟-pg電子官方生物
          發(fā)布時間:2020-07-08     作者:zhn   分享到:

          小鼠體內(nèi)光學成像的原理和實驗步驟-pg電子官方生物


          西安pg電子官方生物科技有限公司整體動物實驗服務(wù),動物造模實驗,動物體內(nèi)光學成像,實驗動物飼養(yǎng)及造模服務(wù)、細胞周期測試、細胞凋亡測試、藥動學實驗外包方面有豐富的經(jīng)驗。提供多種小鼠,大鼠,兔子等動物的活體成像,為您定制**的實驗方案。


          活體動物體內(nèi)光學成像主要采用生物發(fā)光與熒光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶基因(Luciferase)標記細胞或DNA,而熒光技術(shù)則采用綠色熒光蛋白、紅色熒光蛋白等熒光報告基因和FITC、Cy5、Cy7等熒光素及量子點(quantumdotQD)進行標記。


          一、活體動物體內(nèi)光學成像技術(shù)主要有種標記方法。

          生物發(fā)光

          1.熒光素酶基因標記

          熒光素酶基因(Luciferase)標記細胞或DNA

           

          熒光發(fā)光

          1.熒光蛋白標記

          熒光蛋白適用于標記細胞、病毒、基因等,通常使用的是GFP、EGFP、RFPDsRed

          2.熒光染料標記

          熒光染料標記和體外標記方法相同,常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5Cy7,可以標記抗體、多肽、小分子藥物等

          3.量子點標記

          量子點作為一類新型的熒光標記材料,其在長時間生命活動監(jiān)測及活體示蹤方面具有獨特的應用優(yōu)勢。


          二、
          小鼠體內(nèi)光學成像的原理:

          小動物活體成像技術(shù)是采用高靈敏度制冷CCD配合特制的成像暗箱和圖像處理軟件,使得可以直接監(jiān)控活體生物體內(nèi)的細胞活動和基因行為。通過對同一組實驗對象在不同時間點進行記錄,跟蹤統(tǒng)一觀察目標(標記細胞及基因)的移動及變化。操作簡單、所得結(jié)果直觀、靈敏度高,已廣泛應用于生命科學、醫(yī)學研究及藥物開發(fā)等發(fā)面。**學領(lǐng)域:建立**模型,通過活體成像技術(shù)可以測量**的生長、轉(zhuǎn)移以及對藥物的反應,使**學更接近臨床的發(fā)病的微觀環(huán)境。相比傳統(tǒng)方法,不僅靈敏度提高(檢測到微小**病灶),而且適合于**體內(nèi)生長的定量分析,避免由于宰殺老鼠而造成的組間差異。藥物研究:通過活體成像技術(shù)可研究與藥物代謝有關(guān)的基因,藥物作用通路以及藥物的靶向臟器和體內(nèi)分布規(guī)律。

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          三、服務(wù)流程
          1、制作動物模型
          2、細胞標記或動物標記
          3、活體成像
          4、數(shù)據(jù)處理


          四、提供一種小鼠活體成像實驗步驟:
          1).SPFBALB/C裸鼠,68 周齡,1820克,實驗前24 h 自由進食、飲水。
          2)
          .于實驗裸鼠腹腔內(nèi)注射2%戊巴比妥鈉300μL(215 mg/ kg)麻醉動物。將裸鼠俯臥位平放于小動物多光譜活體成像系統(tǒng)的記錄暗箱中。實驗時將Cy7Cy7標記的生物分子或藥物溶于水(或甲醇/乙醇/乙二醇,有時DMSO 200uL能把小鼠殺死)稀釋后,于裸鼠尾靜脈注射200μL(濃度0.5 mg/mL)[用量和時間需要客戶根據(jù)自己的儀器和藥物試劑等條件優(yōu)化]。每5min 記錄1 張動物在體內(nèi)發(fā)射熒光的成像圖片,分析熒光藥物的分布情況。對照鼠不注射藥物,進行同時記錄。記錄結(jié)束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器,進行成像。
          3)
          .Cy7 檢測時激發(fā)波長700770 nm帶通,發(fā)射波長790 nm長通。液晶可調(diào)諧濾光片掃描范圍 780950 nm,掃描步進10 nm。曝光時間為500 ms。

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          結(jié)果說明:不同的藥物代謝時間不一樣,注射入裸鼠體內(nèi),熒光立即分布全身,然后逐步向膀胱聚集,呈現(xiàn)**的腎排泄的特點一般46小時,快的只有30分鐘;如果是骨骼和鼻腔等部位靶點的Cy7標記藥物,有客戶反映一周后活體成像系統(tǒng)仍能檢測到熒光成像。器官切片觀察:將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4小時以上,0%,20%30%PBS蔗糖依次沉底,20μm切片,多聚賴氨酸洗過的載玻片貼片,晾干,DAPI染色。共聚焦顯微鏡觀察,激光器為氦氖 633 nm。


          西安pg電子官方生物提供以下定制服務(wù)項目列表:

          藥物代謝動學參數(shù)分析

          大小鼠高脂血癥模型造模

          大小鼠I型糖尿病模型造模

          大鼠脊髓損傷模型造模

          肝細胞代謝穩(wěn)定性試驗

          基因芯片分析

          藥代體外的吸收、分布、代謝和排泄研究

          藥動代謝物鑒別/分析

          細胞誘導/分化實驗外包

          血漿動力學檢測

          組織分布研究

          細胞毒性實驗

          細胞增殖與活性實驗

          創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)軟骨損傷修復動物模型基因敲除技術(shù)

          藥代動力學體外安全性評價

          血漿蛋白結(jié)合率測定

          血漿穩(wěn)定性試驗

          肝微粒體代謝試驗

          ●CYP450**試驗

          ●CYP450誘導試驗

          代謝產(chǎn)物推測

          代謝產(chǎn)物確證

          代謝途徑的推測

          代謝途徑的確證

          跨膜轉(zhuǎn)運試驗

          藥物-藥物相互作用

          代謝表型研究

          環(huán)孢素mPEG-PLGA嵌段共聚物膠束在大鼠體內(nèi)的藥代實驗外包

          對乙酰氨基酚在大鼠體內(nèi)藥物代謝動力學實驗外包

          丹酚酸B單體在正常大鼠和高脂血癥大鼠體內(nèi)的藥代外包

          熱毒寧注射液在大鼠體內(nèi)的藥代動力學外包

          梔子苷單體在大鼠體內(nèi)的藥代動力學外包

          水飛薊賓口服亞微乳劑在大鼠體內(nèi)的藥動外包

          ●18α-甘草酸二銨對格列本脲在實驗性糖尿病大鼠體內(nèi)藥代實驗

          奈韋拉平納米混懸液在小鼠體內(nèi)的藥代實驗外包

          氟比洛芬微乳在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動力學實驗外包

          半乳糖神經(jīng)酰胺脂質(zhì)體包封的齊多夫啶(azidothymidine,AZT)在小鼠體內(nèi)的藥代外包

          克拉霉素對替硝唑在大鼠體內(nèi)的藥代動力學外包

          奧沙利鉑聚乙二醇修飾脂質(zhì)體在大鼠體內(nèi)的藥代實驗

          京尼平苷酸(GPA)在膽汁淤積型大鼠體內(nèi)的藥代外包

          小檗堿(BBR)在大鼠血漿內(nèi)的藥代動力學實驗外包

          ●8-十六烷基小檗堿(8-BBR-C16)在大鼠血漿內(nèi)的藥動外包

          奧硝唑(ONZ)在重癥急性胰腺炎(SAP)小鼠體內(nèi)的實驗外包

          奧硝唑(ONZ))小鼠體內(nèi)的藥動實驗外包

          ●(modafinil,MOD)在小鼠體內(nèi)的藥動參數(shù)檢測

          葛根芩連湯中小檗堿在糖尿病模型大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測

          酮洛芬(KPF)脂質(zhì)體凝膠在大鼠體內(nèi)的藥代外包

          金森腦泰注射液(CBN)中葛根素在正常大鼠體內(nèi)的藥動外包

          金森腦泰注射液(CBN)中人參皂苷 Rg1在正常大鼠體內(nèi)的藥動參數(shù)檢測

          川芎嗪醇質(zhì)體貼片在大鼠體內(nèi)的藥代動力學實驗外包

          ●(modafinil,MOD)在小鼠體內(nèi)的藥動參數(shù)檢測

          氨溴索對多索茶堿(DP)在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測

          齊墩果酸納米脂質(zhì)體在大鼠體內(nèi)的藥代實驗外包

          口服丁香酚在大鼠體內(nèi)的藥代動力學實驗外包

          四神丸水煎液中補骨脂素和異補骨脂素在大鼠體內(nèi)的藥動實驗外包

          乳糖化-去甲斑蝥素納米粒在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測

          磷酸咯萘啶在小鼠體內(nèi)的藥物代謝動力學實驗參數(shù)檢測

          鹽酸奧昔布寧凝膠劑與片劑在大鼠體內(nèi)的藥代外包

          五柴顆粒中五味子在小鼠體內(nèi)的藥動外包

          黃連-吳茱萸配伍中鹽酸小檗堿在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測

          塞來昔布納米混懸劑(CXB-NSs)在大鼠體內(nèi)的藥動外包

          原兒茶酸在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動力學外包

          康艾注射液和苦參素注射液在大鼠體內(nèi)藥動學外包

          馬兜鈴酸在大鼠體內(nèi)藥代學外包

          內(nèi)脂質(zhì)體干擾素在小鼠體內(nèi)藥代動力學外包

          鹽酸戊乙奎醚在小鼠體內(nèi)藥物代謝動力學外包

          天麻素在大鼠體內(nèi)藥動學研究外包

          綠原酸在大鼠體內(nèi)的藥代學實驗外包

          黃芩苷在大鼠體內(nèi)的藥動學研究外包

          ●(ephedrine,E)在小鼠體內(nèi)藥代動力學研究外包

          銀杏葉提取物含藥血清在大鼠體內(nèi)藥動外包

          脾虛癥大鼠甘草甜素的藥動外包

          芒果苷自微乳給藥系統(tǒng)在大鼠體內(nèi)的藥代實驗

          替莫唑胺固體脂質(zhì)納米粒在小鼠體內(nèi)藥動實驗

          甲氨蝶呤紅細胞載體在大鼠體內(nèi)藥代實驗

          環(huán)孢素固體分散體在大鼠體內(nèi)藥動實驗外包

          ●3-O-蕓香糖苷在大鼠體內(nèi)藥代動力學參數(shù)檢測

          白芍總苷在免疫性肝損傷小鼠體內(nèi)的藥代實驗

          大川芎方多元釋藥系統(tǒng)在小鼠體內(nèi)的藥動參數(shù)檢測

          殼聚糖包覆左旋多巴脂質(zhì)體凍干制劑在大鼠體內(nèi)的藥動實驗外包

          西咪替丁對大鼠體內(nèi)的藥代動力學參數(shù)檢測

          低氧與常氧狀態(tài)下羅紅霉素在大鼠體內(nèi)的藥代外包

          鹽酸阿霉素殼聚糖納米粒在大鼠腦內(nèi)藥代動力學外包

          低分子量肝素凝膠對瘙癢模型小鼠的藥代參數(shù)檢測

          芹菜素囊泡在小鼠體內(nèi)的藥代動力學實驗外包

          重組水蛭素在大鼠體內(nèi)藥物代謝動力學外包

          鹽酸川芎嗪(TMP)經(jīng)大鼠鼻腔給藥后的腦內(nèi)藥動實驗

          知母皂苷B-IISD大鼠體內(nèi)的藥代實驗參數(shù)檢測

          吳茱萸堿脂質(zhì)體在大鼠體內(nèi)的藥代

          冬凌草甲素在小鼠體內(nèi)的藥動

          大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒在小鼠體內(nèi)的藥動外包

          膽固醇-半乳糖配體介導的多烯紫杉醇脂質(zhì)體大鼠體內(nèi)藥代外包

          紫杉醇納米混懸劑在大鼠體內(nèi)的藥動實驗外包

          淡豆豉中異黃酮成分在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測

          黃芩素在大鼠體內(nèi)的藥代動力學實驗外包

          苦參堿在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動力學外包

          尼莫地平前體脂質(zhì)體在小鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測

          鹽酸伊立替康納米粒(irinotecan hydrochloride nanoparticles,CPT-11NPs)在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測

          溫馨提示:西安pg電子官方生物供應的化學試劑、納米材料、藥動學外包產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體


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