本文將中藥姜黃素引入光動力領(lǐng)域，選取溴代烷烴橋連卟啉為原料，利用姜黃素結(jié)構(gòu)中的酚羥基通過共價(jià)鍵連接配體或金屬配合物，制備了新型姜黃素橋連卟啉光敏劑.初步光敏活性研究表明，該光敏劑與DNA結(jié)合能力較強(qiáng)，且對DNA的光敏作用**增強(qiáng).

將1%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的瓊脂糖(含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的EB)制成凝膠.將pBR322質(zhì)粒DNA(1.0ug)分別與不同濃度的卟啉混溶于DMF溶液中，使其總體積為10μL,于37C下用50W高壓汞燈光照射0.5h(距離為20cm),同時(shí)進(jìn)行未光照的對照實(shí)驗(yàn).停止光照后,加入1μL溴酚藍(lán),在100V電壓下將1%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的瓊脂糖(含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的EB)制成凝膠.將pBR322質(zhì)粒DNA(1.0ug)分別與不同濃度的卟啉混溶于DMF溶液中，使其總體積為10μL,于37C下用50W高壓汞燈光照射0.5h(距離為20cm),同時(shí)進(jìn)行未光照的對照實(shí)驗(yàn).停止光照后,加入1μL溴酚藍(lán),在100V電壓下電泳1.5h后,用清水沖洗放人凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果并記錄成像.

 分別對不同梯度濃度的姜黃素原料和姜黃素橋連卟啉銅,鋅,鎳在光照和無光照條件進(jìn)行了DNA切割實(shí)驗(yàn).中藥分子姜黃素作為抗**藥劑,其本身在一定條件下能與DNA作用,圖1中Lanes1~4出現(xiàn)缺刻型DNA(FormI)和線型DNA帶(Form業(yè)),表明低濃度姜黃素在光照下(1.0h)能對超螺旋pBR322刻型DNA(FormI)和線型DNA帶(Form業(yè)),表明低濃度姜黃素在光照下(1.0h)能對超螺旋pBR322質(zhì)粒DNA產(chǎn)生切割;而更低濃度的姜黃素橋連卟啉銅,鋅,鎳在光照和無光照時(shí)均對DNA有明顯切割且光照下尤為突出。

圖1  

圖2為姜黃素橋連卟啉銅,鋅,鎳的DNA切割效果，其中Ianes1~4和6~9可見缺刻型，DNA(FormII),表明橋連卟啉能對DNA產(chǎn)生良好切割，在較短時(shí)間內(nèi)(0.5h)光照部分(Lanes1~4)即出現(xiàn)線型DNA帶(FormM),而單體卟啉長時(shí)間也未出現(xiàn)線型DNA,表明光照下橋連卟啉對DNA的切割效果明顯增強(qiáng).

圖2   

根據(jù)相對較好的切割效果初步推測，橋連卟啉對DNA的切割可能是化學(xué)直接作用和光敏作，用協(xié)同的結(jié)果,姜黃素分子與DNA的結(jié)合增強(qiáng)了卟啉對DNA的親和性，使得卟啉光敏性提高，同時(shí)卟啉促進(jìn)姜黃素的富集，使化學(xué)切割作用得到顯現(xiàn)，進(jìn)而橋連卟啉能對DNA近距離**地作用及切割.

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