液相分離（親水性和疏水性）和質(zhì)譜聯(lián)用的技術(shù)鑒定老鼠以及酵母中的同位素代謝物。

研究方向有：質(zhì)譜蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)、阿爾茨海默病的分子發(fā)病機制、泛素和蛋白質(zhì)組Turnover和**癥的系統(tǒng)生物學(xué)。

高通量非靶向代謝組學(xué)通常依賴于互補液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）方法來擴大各種代謝物的覆蓋范圍，但這些方法的集成尚無法完全表征。我們系統(tǒng)地研究了8種LC-MS設(shè)置，不同固定相（HILIC和C18），流動相（酸性和堿性pH）下親水相互作用液相色譜（HILIC）-MS和納流反相液相色譜（nRPLC）-MS的性能）和MS電離模式（正負）。之前曾報道過nRPLC-MS的優(yōu)化，但我們在HILIC-MS（2.1 mm×150 mm）中發(fā)現(xiàn)，通過從2 mg細胞/組織樣本。由于峰特征受到污染物的高度損害，因此我們使用穩(wěn)定同位素標(biāo)記的酵母來增強配方鑒定，以比較不同的LC-MS條件。8種LC-MS設(shè)置可檢測總共1050個配方，其中**組合分別為4種，3種和2種LC-MS可以回收78％，73％和62％的配方。此外，在存在或不存在氮饑餓的情況下收集這些酵母樣品，從而能夠?qū)Ρ容^的配方和代謝物結(jié)構(gòu)進行定量比較，然后使用選定的合成代謝物進行驗證。

結(jié)果表明，氮饑餓會下調(diào)氨基酸成分，但會上調(diào)尿苷相關(guān)的代謝。

用兩種不同的液相分離（親水性和疏水性）和質(zhì)譜聯(lián)用的技術(shù)，鑒定老鼠以及酵母中的同位素代謝物。設(shè)定了較佳的鑒定參數(shù)，并且對正常酵母和氮饑餓的酵母樣品，進行同位素代謝組學(xué)鑒定。

反相液相色譜法（reverse-phase liquid chromatography，RPLC）是代謝組學(xué)中較常見和實用的一種LC分離方法。但是缺點是對于強極性物質(zhì)保留較差。親水相互作用液相色譜（hydrophilic interaction liquid chromatography，HILIC）是近年來色譜領(lǐng)域研究的熱點之一。

它通過采用強極性度固定相，并且結(jié)合高比例有機相和低比例水相作為流動相。此前文章報道的RPLC和HILIC是主要集中在特征峰的數(shù)目方面，還沒有文章系統(tǒng)比較這兩種方法在代謝組學(xué)上的鑒定和分析。